Ho hlahloba li-leukocyte maling a felletseng ke tlhahlobo e tloaelehileng laboratoring ea bongaka kapa banka ea mali.Ho tsepamisa mohopolo le ho sebetsa ha leukocyte ke index ea bohlokoa e le taolo ea boleng ba polokelo ea mali.Ntle le leukocyte, mali a feletseng a na le palo e kholo ea li-platelet, lisele tse khubelu tsa mali, kapa lithōle tsa lisele, tse etsang hore ho se ke ha khoneha ho hlahloba mali a feletseng ka ho toba tlas'a microscope kapa k'hamphani e khanyang ea lisele tsa tšimo.Mekhoa e tloaelehileng ea ho bala lisele tse tšoeu tsa mali e kenyelletsa ts'ebetso ea RBC lysis, e jang nako.
Ho bala ha AOPI Dual-fluoresces ke mofuta oa liteko o sebelisetsoang ho bona hore na lisele li sebetsa joang.Tharollo ke motsoako oa acridine orange (letheba la nucleic acid e tala-fluorescent) le propidium iodide (letheba le khubelu-fluorescent nucleic acid).Propidium iodide (PI) ke dae e sa kenyelletsoeng lera e kenang feela liseleng tse nang le li-membrane tse senyehileng, athe acridine orange e khona ho kenella liseleng tsohle ho baahi.Ha lidae ka bobeli li le teng khubung, propidium iodide e baka phokotso ea acridine orange fluorescence ka fluorescence resonance energy transfer (FRET).Ka lebaka leo, lisele tsa nucleated tse nang le li-membrane tse sa tsitsang li senya botala ba fluorescent 'me li baloa li phela, athe lisele tsa nucleated tse nang le li-membrane tse senyehileng li senya bofubelu ba fluorescent feela' me li baloa li shoele ha li sebelisa tsamaiso ea Countstar® Rigel.
Countstar Rigel ke tharollo e nepahetseng bakeng sa liteko tse ngata tse rarahaneng tsa sebopeho sa lisele, e thusang ho sekaseka kapele lisele tse tšoeu tsa mali maling a felletseng.
Mokhoa oa Teko:
1. Nka 20 µl ea sampole ea mali 'me u hlapolle sampole ho 180 µl ea PBS.
2.Eketsa tharollo ea 12µl AO/PI ho sampole ea 12µl, e kopantsoeng le pipette ka bonolo;
3.Thala motsoako oa 20µl ka kamoreng ea slide;
4.Lumella lisele hore li lule ka kamoreng ho pota 1 motsotso;
5.Senya selaete ho sesebelisoa sa Countstar FL;
6.Khetha tlhahlobo ea "AO/PI Viability", ebe u Kenya Mohlala oa ID bakeng sa sampole ena.
7.Select Dilution karo-karolelano, Cell Type, ho tobetsa 'Matha' ho qala teko.
Tlhokomeliso: AO le PI ke ntho e ka bakang kankere.Ho khothaletsoa hore motho ea sebetsang a apare lisebelisoa tsa ho itšireletsa (PPE) ho qoba ho kopana ka kotloloho le letlalo le mahlo.
Sephetho:
1. Setšoantšo sa Tšimo se Khanyang sa mali a feletseng
Setšoantšong se khanyang sa tšimo ea mali kaofela, li-WBC ha li bonahale har'a lisele tse khubelu tsa mali.(Setšoantšo sa 1)
Setšoantšo sa 1 Setšoantšo sa tšimo se khanyang sa mali a feletseng.
2. Setšoantšo sa Fluorescence sa mali a feletseng
Dae ea AO le PI ka bobeli ke matheba a DNA khubung ea lisele.Ka hona, liplatelete, lisele tse khubelu tsa mali, kapa litšila tsa cellular ha li khone ho ama mahloriso a leukocyte le sephetho sa ts'ebetso.Li-leukocyte tse phelang (Botala) le li-leukocyte tse shoeleng (Bokhubelu) li bonoa habonolo litšoantšong tsa fluorescence.(Setšoantšo sa 2)
Setšoantšo sa 2 Litšoantšo tsa Fluorescence tsa mali a feletseng.(A).Setšoantšo sa AO Channel;(B) Setšoantšo sa PI Channel;(C) Kopanya litšoantšo tsa AO le PI Channel.
3. Ho tsepamisa maikutlo le ho phela ha leukocyte
Software ea Countstar FL e ipalla lisele tsa likarolo tse tharo tsa likamore 'me e bala palohare ea boleng ba kakaretso ea lisele tsa WBC (1202), mahloriso (1.83 x 106 lisele / ml), le % ts'ebetso (82.04%).Litšoantšo tsohle tsa mali le data li ka romelloa habonolo joalo ka PDF, Image kapa Excel bakeng sa tlhahlobo e eketsehileng kapa polokelo ea data.
Setšoantšo sa 3 Screenshot ea Countstar Rigel Software
