லைசிங் இல்லாமல் முழு இரத்தத்திலும் உள்ள லுகோசைட்டுகளின் நேரடி பகுப்பாய்வு

முழு இரத்தத்திலும் உள்ள லுகோசைட்டுகளை பகுப்பாய்வு செய்வது மருத்துவ ஆய்வகம் அல்லது இரத்த வங்கியில் ஒரு வழக்கமான மதிப்பீடாகும்.லுகோசைட்டுகளின் செறிவு மற்றும் நம்பகத்தன்மை ஆகியவை இரத்த சேமிப்பின் தரக் கட்டுப்பாட்டின் முக்கிய குறியீடாகும்.லுகோசைட் தவிர, முழு இரத்தத்திலும் அதிக எண்ணிக்கையிலான பிளேட்லெட்டுகள், சிவப்பு இரத்த அணுக்கள் அல்லது செல்லுலார் குப்பைகள் உள்ளன, அவை நுண்ணோக்கி அல்லது பிரகாசமான புல செல் கவுண்டரின் கீழ் முழு இரத்தத்தையும் நேரடியாக பகுப்பாய்வு செய்ய இயலாது.வெள்ளை இரத்த அணுக்களை கணக்கிடுவதற்கான வழக்கமான முறைகள் RBC சிதைவு செயல்முறையை உள்ளடக்கியது, இது நேரத்தை எடுத்துக்கொள்ளும்.

AOPI டூயல்-ஃப்ளோரசெஸ் எண்ணிக்கை என்பது செல் செறிவு மற்றும் நம்பகத்தன்மையைக் கண்டறியப் பயன்படுத்தப்படும் மதிப்பீட்டு வகையாகும்.தீர்வு அக்ரிடின் ஆரஞ்சு (பச்சை-ஃப்ளோரசன்ட் நியூக்ளிக் அமிலக் கறை) மற்றும் ப்ரோபிடியம் அயோடைடு (சிவப்பு-ஃப்ளோரசன்ட் நியூக்ளிக் அமிலக் கறை) ஆகியவற்றின் கலவையாகும்.ப்ரோபிடியம் அயோடைடு (PI) என்பது ஒரு சவ்வு விலக்கு சாயமாகும், இது சமரசம் செய்யப்பட்ட சவ்வுகளுடன் மட்டுமே செல்களுக்குள் நுழைகிறது, அதே சமயம் அக்ரிடின் ஆரஞ்சு மக்கள் தொகையில் உள்ள அனைத்து செல்களிலும் ஊடுருவ முடியும்.இரண்டு சாயங்களும் கருவில் இருக்கும்போது, ப்ரோபிடியம் அயோடைடு, ஃப்ளோரசன்ஸ் ரெசோனன்ஸ் எனர்ஜி டிரான்ஸ்ஃபர் (FRET) மூலம் அக்ரிடின் ஆரஞ்சு ஃப்ளோரசன்ஸைக் குறைக்கிறது.இதன் விளைவாக, அப்படியே சவ்வுகளைக் கொண்ட நியூக்ளியேட்டட் செல்கள் ஃப்ளோரசன்ட் பச்சை நிறத்தைக் கறைபடுத்துகின்றன, மேலும் அவை நேரலையாகக் கணக்கிடப்படுகின்றன, அதேசமயம் சமரசம் செய்யப்பட்ட சவ்வுகளைக் கொண்ட நியூக்ளியேட்டட் செல்கள் ஃப்ளோரசன்ட் சிவப்பு நிறத்தை மட்டுமே கறைபடுத்துகின்றன மற்றும் கவுண்ட்ஸ்டார் ® ரைகல் அமைப்பைப் பயன்படுத்தும் போது இறந்ததாகக் கணக்கிடப்படுகின்றன.

Countstar Rigel என்பது பல சிக்கலான உயிரணு மக்கள்தொகை குணாதிசய மதிப்பீடுகளுக்கு ஒரு சிறந்த தீர்வாகும், முழு இரத்தத்தில் உள்ள வெள்ளை இரத்த அணுக்களை விரைவாக பகுப்பாய்வு செய்ய உதவுகிறது.

சோதனை செயல்முறை:

1. 20 µl இரத்த மாதிரியை எடுத்து 180 µl PBS இல் மாதிரியை நீர்த்துப்போகச் செய்யவும்.
2. 12µl AO/PI கரைசலை 12µl மாதிரியில் சேர்க்கவும், மெதுவாக பைப்பெட்டுடன் கலக்கவும்;
3.20µl கலவையை அறை ஸ்லைடில் வரையவும்;
4. செல்களை சுமார் 1 நிமிடம் அறையில் குடியேற அனுமதிக்கவும்;
5. கவுண்ட்ஸ்டார் எஃப்எல் கருவியில் ஸ்லைடைப் பூச்சி;
6. "AO/PI வைபிலிட்டி" மதிப்பீட்டைத் தேர்ந்தெடுத்து, இந்த மாதிரிக்கான மாதிரி ஐடியை உள்ளிடவும்.
7. நீர்த்துப்போதல் விகிதம், செல் வகையைத் தேர்ந்தெடு, சோதனையைத் தொடங்க 'ரன்' என்பதைக் கிளிக் செய்யவும்.

எச்சரிக்கை: AO மற்றும் PI ஒரு சாத்தியமான புற்றுநோயாகும்.தோல் மற்றும் கண்களுடன் நேரடியாகத் தொடர்பு கொள்வதைத் தவிர்க்க, ஆபரேட்டர் தனிப்பட்ட பாதுகாப்பு உபகரணங்களை (PPE) அணியுமாறு பரிந்துரைக்கப்படுகிறது.

விளைவாக:

1. முழு இரத்தத்தின் பிரகாசமான புலப் படம்

முழு இரத்தத்தின் பிரகாசமான புலப் படத்தில், சிவப்பு இரத்த அணுக்களில் WBC கள் தெரியவில்லை.(படம் 1)

படம் 1 முழு இரத்தத்தின் பிரகாசமான புலப் படம்.

2. முழு இரத்தத்தின் ஒளிரும் படம்

AO மற்றும் PI சாயம் இரண்டும் உயிரணுக்களின் செல் அணுக்கருவில் உள்ள கறை டிஎன்ஏ ஆகும்.எனவே, பிளேட்லெட்டுகள், இரத்த சிவப்பணுக்கள் அல்லது செல்லுலார் குப்பைகள் லுகோசைட்டுகளின் செறிவு மற்றும் நம்பகத்தன்மை விளைவை பாதிக்காது.லைவ் லுகோசைட்டுகள் (பச்சை) மற்றும் இறந்த லுகோசைட்டுகள் (சிவப்பு) ஒளிரும் படங்களில் எளிதில் காட்சிப்படுத்தப்படுகின்றன.(படம் 2)

படம் 2 முழு இரத்தத்தின் ஒளிரும் படங்கள்.(A)AO சேனலின் படம்;(B) PI சேனலின் படம்;(C) AO மற்றும் PI சேனலின் படங்களை ஒன்றிணைக்கவும்.

3. லுகோசைட்டுகளின் செறிவு மற்றும் நம்பகத்தன்மை

Countstar FL மென்பொருள் தானாகவே மூன்று அறைப் பிரிவுகளின் செல்களைக் கணக்கிடுகிறது மற்றும் மொத்த WBC செல் எண்ணிக்கை (1202), செறிவு (1.83 x 106 செல்கள்/மிலி) மற்றும் % நம்பகத்தன்மை (82.04%) ஆகியவற்றின் சராசரி மதிப்பைக் கணக்கிடுகிறது.கூடுதல் பகுப்பாய்வு அல்லது தரவு காப்பகத்திற்காக முழு இரத்தப் படங்கள் மற்றும் தரவுகளை PDF, Image அல்லது Excel ஆக எளிதாக ஏற்றுமதி செய்யலாம்.