Ny famakafakana ny leukocytes amin'ny ra manontolo dia fitsirihana mahazatra ao amin'ny laboratoara klinika na banky ra.Ny fifantohana sy ny fahaveloman'ny leokocytes no tondro tena ilaina amin'ny fanaraha-maso ny kalitaon'ny fitahirizana ra.Ankoatra ny leukocyte, ny ra manontolo dia misy platelets, sela mena, na poti-nify amin'ny sela, ka tsy azo atao ny manadihady mivantana ny ra manontolo eo ambanin'ny mikraoskaopy na counter cell cellule.Ny fomba mahazatra amin'ny fanisana ny sela fotsy dia misy ny fizotran'ny lysis RBC, izay mandany fotoana.
Ny fanisana AOPI Dual-fluoresces dia ny karazana assay ampiasaina amin'ny fitiliana ny fifantohana sy ny fahaveloman'ny sela.Ny vahaolana dia fitambaran'ny acridine orange (ny tasy amin'ny asidra nokleika maitso maitso) sy ny propidium iodide (ny tasy amin'ny asidra nukleika mena-fluorescent).Ny propidium iodide (PI) dia loko manilika amin'ny membrane izay miditra ao amin'ny sela misy membranes simba fotsiny, fa ny acridine orange dia afaka miditra amin'ny sela rehetra amin'ny mponina iray.Rehefa misy loko roa ao amin'ny nucleus, ny propidium iodide dia miteraka fampihenana ny fluorescence orange acridine amin'ny alàlan'ny famindrana angovo azo avy amin'ny fluorescence resonance (FRET).Vokatr'izany, ny sela nokleary miaraka amin'ny fonon-tsela tsy misy loto dia mandoto maitso manjelatra ary isaina ho velona, fa ny sela nokleary miaraka amin'ny membrane simba ihany no mandoto mena ary isaina ho maty rehefa mampiasa ny rafitra Countstar® Rigel.
Countstar Rigel dia vahaolana tsara indrindra ho an'ny fandinihan'ny olona maro be pitsiny momba ny sela, ahafahana mamakafaka haingana ny sela fotsy ao amin'ny ra manontolo.
Fomba fanandramana:
1. Makà 20 µl santionany ra ary arotsaho ao anaty 180 µl PBS ilay santionany.
2. Ampio vahaolana 12µl AO/PI amin'ny santionany 12µl, mifangaro moramora amin'ny pipette;
3. Manaova fangaro 20µl ho ao anaty efitrano fitetezana;
4. Avelao hipetraka ao anaty efitrano mandritra ny 1 minitra ny sela;
5. Ampidiro ao amin'ny fitaovana Countstar FL ny slide;
6. Fidio ny "AO / PI Viability" assay, dia ampidiro ID Sample ho an'ity santionany ity.
7.Select Dilution ratio, Cell Type, ny tsindrio 'Run' hanombohana ny fitsapana.
Fampitandremana: Ny AO sy PI dia mety ho carcinogen.Amporisihina ny mpampiasa hanao fitaovana fiarovana manokana (PPE) mba hisorohana ny fifandraisana mivantana amin'ny hoditra sy ny maso.
Vokatra:
1. saha Mamirapiratra Sarin'ny ra manontolo
Ao amin'ny sarin'ny ra manontolo, ny WBC dia tsy hita ao amin'ny sela mena.(sary 1)
Sary 1 Sary an-tsaha mamirapiratra ny ra manontolo.
2. Fluorescence Sarin'ny ra manontolo
Ny loko AO sy PI dia samy mandoko ny ADN ao amin'ny nucleus cellule.Noho izany, ny platelets, ny liomena, na ny poti-nify dia tsy afaka hisy fiantraikany amin'ny fifantohan'ny leukocytes sy ny vokatra azo.Ny leukocytes velona (maitso) sy ny leukocytes maty (mena) dia mora hita amin'ny sary fluorescence.(sary 2)
Sary 2 Fluorescence Sarin'ny ra manontolo.(A).Sarin'ny AO Channel;(B) Sarin'ny PI Channel;(C) Atambatra ny sarin'ny AO sy PI Channel.
3. Ny fifantohana sy ny viability ny leokocytes
Ny rindrambaiko Countstar FL dia manisa ho azy ireo sela amin'ny fizarana efitra telo ary manisa ny sandan'ny salan'isa amin'ny totalin'ny sela WBC (1202), ny fifantohana (1.83 x 106 sela/ml), ary ny % viability (82.04%).Ny sary sy angon-dra manontolo dia azo ondrana mora foana ho PDF, Image na Excel ho an'ny famakafakana fanampiny na fitahirizana angon-drakitra.
Sary 3 Pikantsary an'ny Countstar Rigel Software
