Експериментален протокол
Цитотоксичноста % се пресметува со равенката подолу.
Цитотоксичност % = (Контрола во живо – Број на третирани во живо) / Живи контролни броеви × 100
Со означување на целните туморски клетки со нетоксичен, нерадиоактивен калцеин AM или трансфекција со GFP, можеме да го следиме убивањето на туморските клетки од CAR-T-клетките.Додека живите целни клетки на ракот ќе бидат означени со зелен калцеин AM или GFP, мртвите клетки не можат да ја задржат зелената боја.Hoechst 33342 се користи за боење на сите клетки (и Т-клетките и клетките на туморот), алтернативно, целните туморски клетки може да се обојат со мембрански врзан калцеин AM, PI се користи за боење на мртвите клетки (и Т-клетките и клетките на туморот).Оваа стратегија за боење овозможува да се разликуваат различни клетки.
Е: Т Цитотоксичност зависна од соодносот на K562
Примерот Hoechst 33342, CFSE, PI флуоресцентни слики се целните клетки K562 на t = 3 часа
Резултирачките флуоресцентни слики покажаа зголемување на Hoechst+CFSE+PI+ целните ќелии со зголемување на односот E: T
