Protokollu spirimintali
U % di citotossicità hè calculatu da l'equazioni sottu.
Citotossicità % = (Conti in diretta di cuntrollu - Conti in diretta di trattati) / Conti in diretta di cuntrollu × 100
Etichettendu e cellule tumorali di destinazione cù calceina AM non tossica, non radioattiva o trasfetta cù GFP, pudemu monitorà l'uccisione di e cellule tumorali da e cellule CAR-T.Mentre chì e cellule di cancro di u mira vivu seranu tichjate da una calceina verde AM o GFP, e cellule morte ùn ponu micca mantene a tintura verde.Hoechst 33342 hè aduprata per a macchia di tutte e cellule (sia cellule T è cellule tumorali), in alternativa, e cellule tumorali di destinazione ponu esse macchiate cù calceina ligata à a membrana AM, PI hè usata per macchia e cellule morte (cellule T è cellule tumorali).Questa strategia di tintura permette a discriminazione di e diverse cellule.
E: T Ratio dipendente Citotossicità di K562
L'esempiu Hoechst 33342, CFSE, imagine fluorescenti PI sò e cellule di destinazione K562 à t = 3 ore
Les images fluorescentes résultantes ont montré un accroissement des cellules cibles Hoechst + CFSE + PI + au fur et à mesure que le rapport E: T augmentait
