تجرباتی پروٹوکول
cytotoxicity % کا حساب ذیل کی مساوات سے کیا جاتا ہے۔
سائٹوٹوکسائٹی % = (کنٹرول کی براہ راست تعداد - علاج کی براہ راست تعداد) / کنٹرول کے براہ راست شمار × 100
ہدف والے ٹیومر خلیوں کو غیر زہریلے، غیر تابکار کیلسن AM یا GFP کے ساتھ ٹرانسفیکٹ کے ساتھ لیبل لگا کر، ہم CAR-T خلیوں کے ذریعے ٹیومر کے خلیوں کے قتل کی نگرانی کر سکتے ہیں۔جبکہ زندہ ٹارگٹ کینسر سیلز پر گرین کیلسن AM یا GFP کا لیبل لگایا جائے گا، مردہ خلیے سبز رنگ کو برقرار نہیں رکھ سکتے۔Hoechst 33342 تمام خلیوں (T خلیات اور ٹیومر خلیات دونوں) کے داغ کے لیے استعمال کیا جاتا ہے، متبادل طور پر، ہدف والے ٹیومر کے خلیوں کو جھلی کے پابند کیلسن AM سے داغ دیا جا سکتا ہے، PI مردہ خلیوں (T خلیات اور ٹیومر کے خلیات دونوں) کے داغ کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔یہ داغدار حکمت عملی مختلف خلیوں کے امتیازی سلوک کی اجازت دیتی ہے۔
E: K562 کے T تناسب پر منحصر سائٹوٹوکسیٹی
مثال Hoechst 33342, CFSE, PI فلوروسینٹ امیجز T = 3 گھنٹے پر K562 ٹارگٹ سیلز ہیں۔
نتیجے میں فلوروسینٹ امیجز نے Hoechst+CFSE+PI+ ٹارگٹ سیلز میں اضافہ دکھایا کیونکہ E: T تناسب بڑھ گیا
