פרוטוקול ניסוי
אחוז הציטוטוקסיות מחושב על ידי המשוואה שלהלן.
ציטוטוקסיות % = (ספירות חי של בקרה - ספירות חי של מטופלים) / ספירות חי של ביקורת × 100
על ידי תיוג תאי הגידול היעד עם קלציאין AM לא רעיל ולא רדיואקטיבי או טרנספקט עם GFP, אנו יכולים לעקוב אחר הרג תאי הגידול על ידי תאי CAR-T.בעוד שתאי סרטן מטרה חיים יסומנו על ידי קלציאין ירוק AM או GFP, התאים המתים אינם יכולים לשמור על הצבע הירוק.Hoechst 33342 משמש לצביעה של כל התאים (גם תאי T וגם תאי גידול), לחילופין, ניתן לצבוע תאי מטרה של גידולי מטרה בקלציין AM הקשור לממברנה, PI משמש לצביעה של התאים המתים (הן תאי T ותאי הגידול).אסטרטגיית צביעה זו מאפשרת להבחין בין תאים שונים.
E: ציטוטוקסיות תלוית יחס T של K562
הדוגמאות של Hoechst 33342, CFSE, PI הן תאי המטרה K562 ב-t = 3 שעות
התמונות הפלורסנטיות שהתקבלו הראו עלייה בתאי המטרה של Hoechst+CFSE+PI+ כאשר יחס E:T עלה
