実験プロトコル
細胞毒性％は以下の式で計算されます。
細胞毒性％=（コントロールのライブカウント–処理されたライブカウント）/コントロールのライブカウント×100
標的腫瘍細胞を非毒性、非放射性カルセインAMで標識するか、GFPでトランスフェクトすることにより、CAR-T細胞による腫瘍細胞の死滅を監視できます。生きている標的癌細胞は緑色のカルセインAMまたはGFPで標識されますが、死んだ細胞は緑色の色素を保持できません。Hoechst 33342はすべての細胞（T細胞と腫瘍細胞の両方）の染色に使用されます。あるいは、標的腫瘍細胞は膜結合カルセインAMで染色でき、PIは死細胞（T細胞と腫瘍細胞の両方）の染色に使用されます。この染色戦略により、さまざまな細胞を区別することができます。
E：K562のT比依存性細胞毒性
Hoechst 33342、CFSE、PI蛍光画像の例は、t=3時間でのK562ターゲット細胞です。
得られた蛍光画像は、E：T比が増加するにつれて、Hoechst + CFSE +PI+ターゲット細胞の増加を示しました。
