Eksperimenta Protokolo
La citotokseco% estas kalkulita per la suba ekvacio.
Citotokseco % = (Vivaj kalkuloj de kontrolo - Vivaj kalkuloj de traktitaj) / Vivaj kalkuloj de kontrolo × 100
Etikedante la celajn tumorĉelojn per ne-toksa, ne-radiaktiva kalceino AM aŭ transfekto kun GFP, ni povas monitori la mortigon de la tumorĉeloj de CAR-T-ĉeloj.Dum vivaj celaj kanceraj ĉeloj estos etikeditaj per verda kalceino AM aŭ GFP, la mortaj ĉeloj ne povas reteni la verdan tinkturfarbon.Hoechst 33342 estas uzata por makuli ĉiujn ĉelojn (kaj T-ĉeloj kaj tumorĉeloj), alternative, celaj tumorĉeloj povas esti makulitaj per membrano ligita kalceino AM, PI estas uzata por makuli la mortajn ĉelojn (kaj T-ĉeloj kaj tumorĉeloj).Tiu makuladstrategio permesas la diskriminacion de malsamaj ĉeloj.
E: T Proporcio dependa Citotokseco de K562
La ekzemplo Hoechst 33342, CFSE, PI-fluoreskaj bildoj estas la K562-celĉeloj je t = 3 horoj
La rezultaj fluoreskaj bildoj montris pliiĝon en Hoechst+CFSE+PI+ Celĉeloj kiam E:T-proporcio pliiĝis
