โปรโตคอลทดลอง
% ความเป็นพิษต่อเซลล์คำนวณโดยสมการด้านล่าง
ความเป็นพิษต่อเซลล์ % = (การนับสดของการควบคุม – การนับสดของการรักษา) / การนับสดของการควบคุม × 100
โดยการติดฉลากเซลล์เนื้องอกเป้าหมายด้วย calcein AM ที่ไม่เป็นพิษและไม่มีกัมมันตภาพรังสี หรือการทรานส์เฟกด้วย GFP เราสามารถตรวจสอบการฆ่าเซลล์เนื้องอกโดยเซลล์ CAR-Tแม้ว่าเซลล์มะเร็งเป้าหมายที่มีชีวิตจะถูกระบุว่าเป็นแคลเซอินสีเขียว AM หรือ GFP แต่เซลล์ที่ตายแล้วจะไม่สามารถเก็บสีย้อมสีเขียวไว้ได้Hoechst 33342 ใช้สำหรับย้อมเซลล์ทั้งหมด (ทั้งทีเซลล์และเซลล์เนื้องอก) อีกวิธีหนึ่งคือ เซลล์เนื้องอกเป้าหมายสามารถย้อมด้วยแคลเซอิน AM ที่จับกับเมมเบรน PI ใช้สำหรับย้อมเซลล์ที่ตายแล้ว (ทั้งทีเซลล์และเซลล์เนื้องอก)กลยุทธ์การย้อมสีนี้ช่วยให้สามารถแยกแยะเซลล์ต่างๆ
E: T อัตราส่วนความเป็นพิษต่อเซลล์ของ K562
ตัวอย่างภาพ Hoechst 33342, CFSE, PI fluorescent คือเซลล์เป้าหมาย K562 ที่ t = 3 ชั่วโมง
รูปภาพเรืองแสงที่ได้แสดงการเพิ่มขึ้นในเซลล์เป้าหมาย Hoechst+CFSE+PI+ เมื่ออัตราส่วน E: T เพิ่มขึ้น
