Eksperimentel protokol
Cytotoksiciteten % beregnes ved ligningen nedenfor.
Cytotoksicitet % = (levende tællinger af kontrol – levende tællinger af behandlede) / Live tællinger af kontrol × 100
Ved at mærke måltumorcellerne med ikke-toksisk, ikke-radioaktiv calcein AM eller transfektere med GFP, kan vi overvåge drabet af tumorcellerne af CAR-T-celler.Mens levende målkræftceller vil blive mærket af en grøn calcein AM eller GFP, kan de døde celler ikke beholde det grønne farvestof.Hoechst 33342 bruges til farvning af alle celler (både T-celler og tumorceller), alternativt kan måltumorceller farves med membranbundet calcein AM, PI bruges til farvning af de døde celler (både T-celler og tumorceller).Denne farvningsstrategi giver mulighed for at skelne mellem forskellige celler.
E: T-forholdsafhængig cytotoksicitet af K562
Eksemplet Hoechst 33342, CFSE, PI fluorescerende billeder er K562 målcellerne ved t = 3 timer
De resulterende fluorescerende billeder viste stigning i Hoechst+CFSE+PI+-målceller, da E:T-forholdet steg
