Protokolo esperimentala
Zitotoxikotasunaren % beheko ekuazioaren bidez kalkulatzen da.
Zitotoxikotasunaren % = (Kontrolaren bizi-zenbaketa - Tratatutakoen bizi-zenbaketa) / Kontrol-zenbaketa biziak × 100
Helburuko tumore-zelulak AM ez-toxiko eta erradioaktiboko kaltzeinaz edo GFP-rekin transfektatuaz etiketatuz, CAR-T zelulek tumore-zelulen hilketa kontrolatu dezakegu.Zuzeneko minbizi-zelulak AM edo GFP kaltzeina berde batekin etiketatuko diren bitartean, hildako zelulek ezin dute tindaketa berdea mantendu.Hoechst 33342 zelula guztiak (bai T zelulak bai tumore-zelulak) zikindu erabiltzen da, bestela, xede tumore-zelulak mintzarekin loturiko AM kaltzeinarekin tinda daitezke, PI hildako zelulak (bai T zelulak eta tumore-zelulak) zikindu ahal izateko.Tindaketa estrategia honek zelula desberdinak bereiztea ahalbidetzen du.
E: T K562ren zitotoxikotasunaren menpeko ratioa
Hoechst 33342, CFSE, PI irudi fluoreszenteak K562 xede-zelulak dira t = 3 ordutan
Ondorioz, irudi fluoreszenteek Hoechst+CFSE+PI+ Helburuko zelulen hazkundea erakutsi zuten E: T ratioa handitu ahala.
