Protokolli Eksperimental
Citotoksiciteti % llogaritet nga ekuacioni i mëposhtëm.
Citotoksiciteti % = (Numrat e gjalla të kontrollit – Numri i gjallë i të trajtuarve) / Numri i gjallë i kontrollit × 100
Duke etiketuar qelizat tumorale të synuara me kalcein AM jo toksike, jo radioaktive ose transfektuar me GFP, ne mund të monitorojmë vrasjen e qelizave tumorale nga qelizat CAR-T.Ndërsa qelizat e gjalla të kancerit të synuara do të etiketohen nga një kalceinë e gjelbër AM ose GFP, qelizat e vdekura nuk mund të mbajnë ngjyrën jeshile.Hoechst 33342 përdoret për ngjyrosjen e të gjitha qelizave (si qelizat T ashtu edhe qelizat tumorale), si alternativë, qelizat e tumorit të synuar mund të ngjyrosen me kalceinën AM të lidhur me membranë, PI përdoret për ngjyrosjen e qelizave të vdekura (si qelizat T ashtu edhe qelizat tumorale).Kjo strategji e ngjyrosjes lejon diskriminimin e qelizave të ndryshme.
E: T citotoksiciteti i varur nga raporti i K562
Shembulli Hoechst 33342, CFSE, imazhet fluoreshente PI janë qelizat e synuara K562 në t = 3 orë
Imazhet fluoreshente që rezultuan treguan rritje në qelizat e synuara Hoechst+CFSE+PI+ ndërsa raporti E: T u rrit
