Kokeellinen pöytäkirja
Sytotoksisuusprosentti lasketaan alla olevan yhtälön avulla.
Sytotoksisuus % = (kontrollin elävät määrät – käsiteltyjen elävien määrät) / kontrollin elävät määrät × 100
Merkitsemällä kohdekasvainsolut myrkyttömällä, ei-radioaktiivisella kalseiini AM:llä tai transfektoimalla GFP:llä, voimme seurata kasvainsolujen tappamista CAR-T-solujen toimesta.Vaikka elävät kohdesyöpäsolut leimataan vihreällä kalseiini AM:llä tai GFP:llä, kuolleet solut eivät voi säilyttää vihreää väriainetta.Hoechst 33342:ta käytetään kaikkien solujen värjäämiseen (sekä T-solut että kasvainsolut), vaihtoehtoisesti kohdekasvainsolut voidaan värjätä kalvoon sitoutuneella kalseiini AM:llä, PI:tä käytetään kuolleiden solujen (sekä T-solujen että kasvainsolujen) värjäämiseen.Tämä värjäysstrategia mahdollistaa eri solujen erottamisen.
E: T K562:n suhteesta riippuva sytotoksisuus
Esimerkki Hoechst 33342, CFSE, PI fluoresoivat kuvat ovat K562-kohdesoluja t = 3 tuntia
Tuloksena saadut fluoresoivat kuvat osoittivat Hoechst+CFSE+PI+-kohdesolujen lisääntymistä, kun E:T-suhde kasvoi
