Eksperiminteel protokol
De cytotoxicity% wurdt berekkene troch de fergeliking hjirûnder.
Cytotoxicity % = (Live counts of control - Live counts of behannele) / Live counts of control × 100
Troch de doeltumorsellen te labeljen mei net-giftige, net-radioaktyf kalceïne AM of transfektearje mei GFP, kinne wy it deadzjen fan 'e tumorsellen troch CAR-T-sellen kontrolearje.Wylst live doelkankersellen sille wurde markearre troch in griene calcein AM of GFP, kinne de deade sellen de griene kleurstof net behâlde.Hoechst 33342 wurdt brûkt foar stain alle sellen (sawol T-sellen as tumor sellen), as alternatyf, doel tumor sellen kinne wurde kleurd mei membraan bound calcein AM, PI wurdt brûkt foar stain de deade sellen (sawol T sellen as tumor sellen).Dizze kleuringsstrategy makket it mooglik om ferskate sellen te diskriminearjen.
E: T Ferhâlding ôfhinklik Cytotoxicity fan K562
It foarbyld Hoechst 33342, CFSE, PI fluorescent bylden binne de K562 doelsellen by t = 3 oeren
De resultearjende fluorescent ôfbyldings lieten ferheging sjen yn Hoechst + CFSE + PI + Doelzellen as E: T-ferhâlding tanommen
