Эксперименттик протокол
Цитотоксиндүүлүк % төмөндөгү теңдеме менен эсептелет.
Цитотоксиндүүлүк % = (Контролдун жандуу саны – Дарылангандардын жандуу саны) / Көзөмөлдүн жандуу саны × 100
Максаттуу шишик клеткаларын уулуу эмес, радиоактивдүү эмес кальцин AM менен белгилөө же GFP менен трансфекциялоо менен биз шишик клеткаларынын CAR-T клеткалары тарабынан өлтүрүлүшүн көзөмөлдөй алабыз.Тирүү максаттуу рак клеткалары жашыл кальцин AM же GFP менен белгиленет, ал эми өлгөн клеткалар жашыл боёкту сактай албайт.Hoechst 33342 бардык клеткаларды (Т-клеткаларын да, шишик клеткаларын да) боёо үчүн колдонулат, альтернатива катары, максаттуу шишик клеткаларын мембрана менен байланышкан AM calcein менен боёсо болот, PI өлүк клеткаларды (Т-клеткаларын да, шишик клеткаларын да) боёо үчүн колдонулат.Бул боёо стратегиясы ар кандай клеткаларды дискриминациялоого мүмкүндүк берет.
E: K562нин T катышына көз каранды цитотоксиндүүлүгү
Мисал Hoechst 33342, CFSE, PI флуоресценттик сүрөттөрү t = 3 саатта K562 максаттуу клеткалар
Алынган флуоресценттик сүрөттөр E: T катышы көбөйгөн сайын Hoechst+CFSE+PI+ максаттуу клеткалардын көбөйгөнүн көрсөттү
