Protokol Eksperimental
Sitotoksisitas% diwilang kanthi persamaan ing ngisor iki.
Sitotoksisitas % = (Jumlah kontrol urip – Jumlah sing diobati) / Jumlah kontrol langsung × 100
Kanthi menehi label sel tumor target kanthi calcein AM non-beracun, non-radioaktif utawa transfek karo GFP, kita bisa ngawasi mateni sel tumor dening sel CAR-T.Nalika sel kanker target urip bakal diwenehi label AM calcein ijo utawa GFP, sel mati ora bisa nahan pewarna ijo.Hoechst 33342 digunakake kanggo noda kabeh sel (loro sel T lan sel tumor), Utawa, sel tumor target bisa diwarnai karo membran bound calcein AM, PI digunakake kanggo noda sel mati (loro sel T lan sel tumor).Strategi pewarnaan iki ngidini kanggo mbedakake sel sing beda.
E: T Rasio gumantung Sitotoksisitas K562
Conto Hoechst 33342, CFSE, PI gambar neon yaiku sel target K562 ing t = 3 jam
Gambar fluoresensi sing diasilake nuduhake paningkatan sel target Hoechst + CFSE + PI + amarga rasio E: T tambah.
