Эксперименттік хаттама
Цитоуыттылық % төмендегі теңдеу арқылы есептеледі.
Цитоуыттылық % = (Бақылаудың тірі саны – Өңделгендердің тірі саны) / Бақылаудың тірі саны × 100
Мақсатты ісік жасушаларын уытты емес, радиоактивті емес кальцинмен AM немесе GFP трансфекциясымен таңбалау арқылы біз CAR-T жасушаларының ісік жасушаларын өлтіруін бақылай аламыз.Тірі мақсатты ісік жасушалары жасыл кальцинмен AM немесе GFP белгісімен белгіленсе де, өлі жасушалар жасыл бояуды сақтай алмайды.Hoechst 33342 барлық жасушаларды (Т жасушаларын да, ісік жасушаларын да) бояу үшін қолданылады, баламалы түрде мақсатты ісік жасушаларын мембранамен байланысқан AM кальцеинімен бояуға болады, PI өлі жасушаларды (Т жасушаларын да, ісік жасушаларын да) бояу үшін қолданылады.Бұл бояу стратегиясы әртүрлі жасушаларды ажыратуға мүмкіндік береді.
E: T қатынасына тәуелді K562 цитоуыттылығы
Hoechst 33342, CFSE, PI флуоресцентті суреттер мысалы t = 3 сағаттағы K562 мақсатты ұяшықтары болып табылады.
Алынған флуоресцентті кескіндер Hoechst+CFSE+PI+ мақсатты жасушаларының E: T қатынасының жоғарылауына байланысты ұлғайғанын көрсетті.
