प्रायोगिक प्रोटोकॉल
साइटोटोक्सिसिटी% की गणना नीचे दिए गए समीकरण द्वारा की जाती है।
साइटोटोक्सिसिटी% = (लाइव काउंट्स ऑफ़ कंट्रोल - लाइव काउंट्स ऑफ़ ट्रीटेड) / लाइव काउंट ऑफ़ कंट्रोल × 100
लक्ष्य ट्यूमर कोशिकाओं को गैर-विषैले, गैर-रेडियोधर्मी कैल्सीन एएम या जीएफपी के साथ ट्रांसफेक्ट के साथ लेबल करके, हम सीएआर-टी कोशिकाओं द्वारा ट्यूमर कोशिकाओं की हत्या की निगरानी कर सकते हैं।जबकि जीवित लक्ष्य कैंसर कोशिकाओं को हरे कैल्सीन एएम या जीएफपी द्वारा लेबल किया जाएगा, मृत कोशिकाएं हरे रंग को बरकरार नहीं रख सकती हैं।Hoechst 33342 का उपयोग सभी कोशिकाओं (टी कोशिकाओं और ट्यूमर कोशिकाओं दोनों) को दागने के लिए किया जाता है, वैकल्पिक रूप से, लक्ष्य ट्यूमर कोशिकाओं को झिल्ली बाध्य कैल्सीन एएम के साथ दाग दिया जा सकता है, पीआई का उपयोग मृत कोशिकाओं (टी कोशिकाओं और ट्यूमर कोशिकाओं दोनों) को दागने के लिए किया जाता है।यह धुंधला रणनीति विभिन्न कोशिकाओं के भेदभाव के लिए अनुमति देता है।
ई: K562 की टी अनुपात निर्भर साइटोटोक्सिसिटी
उदाहरण Hoechst 33342, CFSE, PI फ्लोरोसेंट छवियां t = 3 घंटे पर K562 लक्ष्य कक्ष हैं
परिणामी फ्लोरोसेंट छवियों ने ई: टी अनुपात में वृद्धि के रूप में होचस्ट + सीएफएसई + पीआई + लक्ष्य कोशिकाओं में वृद्धि दिखाई
