פּעריפעראַל בלוט מאָנאָנוקלעאַר סעלז (פּבמק) זענען אָפט פּראַסעסט צו באַזונדער פון גאַנץ בלוט דורך געדיכטקייַט גראַדיענט סענטריפוגיישאַן.די סעלז זענען צונויפשטעלנ פון לימפאָסיטעס (ט סעלז, ב סעלז, NK סעלז) און מאַנאַסיטעס, קאַמאַנלי געניצט אין די פעלד פון ימיונאַלאַדזשי, צעל טעראַפּיע, ינפעקטיאָוס קרענק און וואַקצין אַנטוויקלונג.מאָניטאָרינג און אַנאַלייזינג ווייאַבילאַטי און קאַנסאַנטריישאַן פון PBMC איז קריטיש פֿאַר די קליניש לאַבאָראַטאָריעס, יקערדיק מעדיציניש וויסנשאַפֿט פאָרשונג און ימיון צעל פּראָדוקציע.
פייַג 1. אפגעזונדערט פּבמק פון פריש בלוט מיט דענסיטי גראַדיענט סענטריפוגאַטיאָן
AOPI צווייענדיק-פלואָרעססעס קאַונטינג איז די אַסיי טיפּ געניצט פֿאַר דיטעקטינג צעל קאַנסאַנטריישאַן און ווייאַבילאַטי.די לייזונג איז אַ קאָמבינאַציע פון אַקרידינע מאַראַנץ (די גרין-פלורעסאַנט נוקלעיק זויער פלעק) און פּראָפּידיום יאָדידע (די רויט-פלורעסאַנט נוקלעיק זויער פלעק).פּראָפּידיום יאָדידע (פּי) איז אַ מעמבראַנע יקסקלוזשאַן פאַרב וואָס נאָר גייט אריין סעלז מיט קאַמפּראַמייזד מעמבריינז, בשעת אַקרידין מאַראַנץ איז ביכולת צו דורכנעמען אַלע סעלז אין אַ באַפעלקערונג.ווען ביידע דיעס זענען פאָרשטעלן אין די קערן, פּראָפּידיום ייאַדייד ז אַ רעדוקציע אין אַקרידין מאַראַנץ פלואָרעססענסע דורך פלואָרעססענסע אפקלאנג ענערגיע אַריבערפירן (FRET).ווי אַ רעזולטאַט, נוקלעאַטעד סעלז מיט בעשאָלעם מעמבריינז פלעק פלורעסאַנט גרין און זענען גערעכנט ווי לעבן, כוועראַז נוקלעאַטעד סעלז מיט קאַמפּראַמייזד מעמבריינז בלויז פלעק פלורעסאַנט רויט און זענען גערעכנט ווי טויט ווען ניצן די Countstar® FL סיסטעם.ניט-נוקלעאַטעד מאַטעריאַל אַזאַ ווי רויט בלוט סעלז, פּלאַטעלעץ און דעבריס טאָן ניט פלואָרעסס און זענען איגנאָרירט דורך די Countstar® FL ווייכווארג.
עקספּערימענטאַל פּראָצעדור:
1.דילוטע די פּבמק מוסטער אין 5 פאַרשידענע קאַנסאַנטריישאַנז מיט פּבס;
2.אַדד 12μל אַאָ / פּי לייזונג אין 12μל מוסטער, דזשענטלי געמישט מיט פּיפּעטטע;
3.דראַוו 20μל געמיש אין קאַמער רוק;
4.אַלאַו די סעלז צו פאַרענטפערן אין די קאַמער פֿאַר אַרום 1 מינוט;
5.ינסעקט די רוק אין Countstar FL קיילע;
6. טשאָאָסע די "אַאָ / פּי וויאַביליטי" אַסייַ, דעמאָלט פּרובירן דורך Countstar FL.
וואָרענען: אַאָ און פּי איז אַ פּאָטענציעל קאַרסינאַדזשאַן.עס איז רעקאַמענדיד אַז דער אָפּעראַטאָר טראָגן פּערזענלעך פּראַטעקטיוו עקוויפּמענט (פּפּע) צו ויסמיידן גלייך קאָנטאַקט מיט הויט און אויגן.
רעזולטאט:
1. ברייט פיעלד און פלואָרעססענסע בילדער פון די פּבמק
די AO און PI פאַרב זענען ביידע סטאַינס דנאַ אין די צעל קערן פון סעלז.דעריבער, פּלאַטעלעץ, רויט בלוט סעלז אָדער סעליאַלער דעבריס קענען נישט ווירקן די קאַנסאַנטריישאַן און ווייאַבילאַטי פון PBMCs.לעבעדיק סעלז, טויט סעלז און דעבריס קענען זיין לייכט אונטערשיידן באזירט אויף די בילדער דזשענערייטאַד דורך Countstar FL (פיגורע 1).
פיגורע 2. העל פיעלד און פלואָרעססענסע בילדער פון די PBMC
2.קאַנסאַנטריישאַן און ווייאַבילאַטי פון פּבמק
די PBMC סאַמפּאַלז זענען דיילוטאַד אין 2, 4, 8 און 16 מאל מיט PBS, און די סאַמפּאַלז זענען ינקובייטיד מיט אַ אַאָ / פּי פאַרב געמיש און אַנאַלייזד דורך Countstar FL ריספּעקטיוולי.דער רעזולטאַט פון קאַנסאַנטריישאַן און ווייאַבילאַטי פון PBMC איז געוויזן ווי אונטן פיגור:
