Dual-fluorescence Viability (AO/PI), akridiinioranssi (AO) ja propidiumjodidi (PI) ovat ydinnukleiinivärjäyksiä ja happoa sitovia väriaineita.AO voi tunkeutua sekä kuolleiden että elävien solujen kalvoon ja värjätä ytimen muodostaen vihreää fluoresenssia.Sitä vastoin PI voi läpäistä vain kuolleiden tumallisten solujen hajoavat kalvot ja tuottaa punaista fluoresenssia.Countstar Rigelin kuvapohjainen tekniikka sulkee pois solufragmentit, jätteet ja artefaktihiukkaset sekä alikokoiset tapahtumat, kuten verihiutaleet, mikä antaa erittäin tarkan tuloksen.Yhteenvetona voidaan todeta, että Countstar Rigel -järjestelmää voidaan käyttää solunvalmistusprosessin jokaisessa vaiheessa.

T/NK-soluvälitteinen sytotoksisuus, FDA:n äskettäin hyväksymässä CAR-T-soluterapiassa geneettisesti muokatut T-lymfosyytit sitoutuvat spesifisesti kohdennettuihin syöpäsoluihin (T) ja tappavat ne.Countstar Rigel -analysaattorit pystyvät analysoimaan tämän täydellisen T/NK-soluvälitteisen sytotoksisuuden prosessin.

Sytotoksisuustutkimukset suoritetaan leimaamalla kohdesyöpäsolut CFSE:llä tai transfektoimalla ne GFP:llä.Hoechst 33342:ta voidaan käyttää värjäämään kaikki solut (sekä T-solut että kasvainsolut).Vaihtoehtoisesti kohdetuumorisolut voidaan värjätä CFSE:llä.Propidiumjodidia (PI) käytetään kuolleiden solujen (sekä T-solujen että kasvainsolujen) värjäämiseen.Tätä värjäysstrategiaa käyttämällä voidaan saada aikaan ero eri solujen välillä.

GFP-transfektion tehokkuus, molekyyligenetiikassa, erilaisissa malliorganismeissa ja solubiologiassa GFP-geeniä käytetään usein reportterina ilmentymistutkimuksissa.Tällä hetkellä tutkijat käyttävät yleensä fluoresoivia mikroskooppeja tai virtaussytometrejä analysoidakseen nisäkässolujen transfektiotehokkuutta.Mutta edistyneen virtaussytometrin monimutkaisen tekniikan käsittely vaatii kokenutta ja erittäin pätevää käyttäjää.Countstar Rigelin avulla käyttäjät voivat helposti ja tarkasti suorittaa transfektion tehokkuusmäärityksen ilman perinteiseen virtaussytometriaan liittyviä käyttö- ja ylläpitokustannuksia.

Soluapoptoosi, Soluapoptoosin etenemistä voidaan seurata käyttämällä FITC-konjugoitua anneksiini-V:tä yhdessä 7-ADD:n kanssa.Fosfatidyyliseriini (PS) -tähteet sijaitsevat normaalisti terveiden solujen plasmakalvon sisäpuolella.Varhaisen apoptoosin aikana kalvon eheys katoaa ja PS siirtyy solukalvon ulkopuolelle.Anneksiini V:llä on vahva affiniteetti PS:ään ja siksi se on ihanteellinen merkkiaine varhaisille apoptoottisille soluille.

Solusykli, Solunjakautumisen aikana solut sisältävät lisääntyneitä määriä DNA:ta.PI:llä leimattu fluoresenssin intensiteetin kasvu on suoraan verrannollinen DNA:n kertymiseen.Erot yksittäisten solujen fluoresenssin intensiteetissä ovat solusyklin todellisen tilan indikaattoreita. MCF 7 -soluja käsiteltiin 4 µM:lla nocodatsolia näiden solujen pysäyttämiseksi niiden solusyklin eri vaiheissa.Tämän testiskenaarion aikana saadut kirkkaat kentät antavat meille mahdollisuuden tunnistaa jokainen yksittäinen solu.Countstar Rigelin PI-fluoresenssikanava tunnistaa yksittäisten solujen DNA-signaalit jopa aggregaatteina.Fluoresenssin intensiteettien yksityiskohtainen analyysi voidaan suorittaa käyttämällä FCS:ää.

CD Marker Phenotyping, Countstar Rigel -mallit tarjoavat nopeamman, yksinkertaisemman ja herkemmän lähestymistavan, immuunipohjaiseen solujen fenotyypitykseen tehokkaammin.Korkean resoluution kuvien ja tehokkaiden integroitujen tietojen analysointiominaisuuksien ansiosta Countstar Rigelin avulla käyttäjät voivat saavuttaa jatkuvasti luotettavia tuloksia ilman laajoja monimutkaisia ​​ohjausasetuksia ja fluoresenssikompensaatiosäätöjä.

Cytokine Induced Killer (CIK) -solujen erilaistuminen osoittaa Countstar Rigel -analysaattorin erinomaisen suorituskyvyn verrattuna suoraan korkealuokkaisiin virtaussytometreihin.Viljelmässä olevat hiiren PBMC:t värjättiin CD3-FITC:llä, CD4-PE:llä, CD8-PE:llä ja CD56-PE:llä ja indusoitiin interleukiinilla (IL) 6. Sitten analysoitiin samanaikaisesti Countstar® Rigelillä ja Flow Cytometryllä.Tässä testissä CD3-CD4, CD3-CD8 ja CD3-CD56 jaettiin kolmeen ryhmään erilaisten solualapopulaatioiden osuuden määrittämiseksi.

Degeneroituneiden solujen havaitseminen immunofluoresenssilla. Monoklonaalisia vasta-aineita tuottavat solulinjat menettävät joitakin positiivisia klooneja solujen lisääntymisen ja siirrostuksen aikana hajoamisen tai geneettisten mutaatioiden vuoksi.Suurempi hävikki vaikuttaa merkittävästi valmistusprosessin tuottavuuteen.Hajoamisen seurannalla on tärkeä rooli prosessin ohjauksessa vasta-aineiden saannon siirtämiseksi optimiarvoon.

Suurin osa BioPharma-teollisuudessa valmistetuista vasta-aineista voidaan havaita immunofluoresenssileimauksella ja analysoida kvantitatiivisesti Countstar Rigel -sarjalla.Alla olevat kirkaskenttä- ja fluoresenssikanavakuvat osoittavat selvästi ne kloonit, jotka menettivät ominaisuutensa tuottaa haluttuja vasta-aineita.Tarkempi analyysi DeNovo FCS Express Image -ohjelmistolla vahvistaa, että 86,35 % kaikista soluista ekspressoi immunoglobuliineja, vain 3,34 % on selvästi negatiivisia.

Trypaani (kirjain B sinisellä) Solulaskenta, Trypaaninsinistä värjäystä käytetään edelleen useimmissa soluviljelylaboratorioissa.

Trypan Blue Viability and Cell Density BioApp voidaan asentaa kaikkiin Countstar Rigel -malleihin.Suojatut kuvantunnistusalgoritmimme analysoivat yli 20 parametria luokitellakseen jokaisen havaitun kohteen.

Cell Line Storage QC, Soluvarastoissa kehittynyt laadunhallintakonsepti varmistaa kaikkien solukkotuotteiden turvallisen ja tehokkaan seurannan.Tämä takaa kokeita, prosessikehitystä ja tuotantoa varten kylmäsäilytettyjen solujen vakaan laadun.

Countstar Rigel hankkii korkearesoluutioisia kuvia analysoiden solun esineiden erilaisia ​​morfologisia ominaisuuksia, kuten halkaisijaa, muotoa ja aggregaatiotaipumusta.Kuvia eri prosessivaiheista voidaan helposti verrata toisiinsa.Joten muodon ja aggregaation vaihtelut voidaan helposti havaita välttämällä subjektiivisia ihmisen mittauksia.Ja Countstar Rigel -tietokannassa on kehittynyt hallintajärjestelmä kuvien ja tietojen tallentamista ja hakua varten.