दोहरी-प्रतिदीप्ति व्यवहार्यता (एओ/पीआई), एक्रिडीन नारंगी (एओ) और प्रोपीडियम आयोडाइड (पीआई) परमाणु न्यूक्लिक धुंधला और एसिड-बाध्यकारी रंग हैं।एओ मृत और जीवित दोनों कोशिकाओं की झिल्ली में प्रवेश कर सकता है और नाभिक को दाग देता है, जिससे एक हरा प्रतिदीप्ति उत्पन्न होता है।इसके विपरीत, PI केवल मृत न्यूक्लियेटेड कोशिकाओं के विघटनकारी झिल्लियों में प्रवेश कर सकता है, जिससे लाल प्रतिदीप्ति उत्पन्न होती है।काउंटस्टार रिगेल की छवि-आधारित तकनीक अत्यधिक सटीक परिणाम देते हुए, सेल के टुकड़े, मलबे और आर्टिफैक्ट कणों के साथ-साथ प्लेटलेट्स जैसी छोटी घटनाओं को बाहर करती है।अंत में, सेल निर्माण प्रक्रिया के हर चरण के लिए काउंटस्टार रिगेल प्रणाली का उपयोग किया जा सकता है।
टी/एनके सेल-मध्यस्थता साइटोटोक्सिसिटी, हाल ही में एफडीए द्वारा अनुमोदित सीएआर-टी सेल थेरेपी में, आनुवंशिक रूप से इंजीनियर टी-लिम्फोसाइट्स विशेष रूप से लक्षित कैंसर कोशिकाओं (टी) से जुड़ते हैं और उन्हें मार देते हैं।काउंटस्टार रिगेल विश्लेषक टी/एनके सेल-मध्यस्थता साइटोटोक्सिसिटी की इस पूरी प्रक्रिया का विश्लेषण करने में सक्षम हैं।
साइटोटोक्सिसिटी अध्ययन लक्ष्य कैंसर कोशिकाओं को सीएफएसई के साथ लेबल करके या उन्हें जीएफपी के साथ संक्रमित करके किया जाता है।Hoechst 33342 का उपयोग सभी कोशिकाओं (टी कोशिकाओं और ट्यूमर कोशिकाओं दोनों) को दागने के लिए किया जा सकता है।वैकल्पिक रूप से, लक्ष्य ट्यूमर कोशिकाओं को CFSE के साथ दाग दिया जा सकता है।प्रोपीडियम आयोडाइड (पीआई) का उपयोग मृत कोशिकाओं (टी कोशिकाओं और ट्यूमर कोशिकाओं दोनों) को दागने के लिए किया जाता है।इस धुंधला रणनीति का उपयोग करके विभिन्न कोशिकाओं के बीच भेदभाव प्राप्त किया जा सकता है।
जीएफपी ट्रांसफेक्शन दक्षता, आणविक आनुवंशिकी, विभिन्न मॉडल जीवों और कोशिका जीव विज्ञान में, जीएफपी जीन को अक्सर अभिव्यक्ति अध्ययन के लिए एक रिपोर्टर के रूप में उपयोग किया जाता है।वर्तमान में, वैज्ञानिक आमतौर पर स्तनधारी कोशिकाओं की ट्रांसफेक्शन दक्षता का विश्लेषण करने के लिए फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप या फ्लो साइटोमीटर का उपयोग कर रहे हैं।लेकिन एक उन्नत प्रवाह साइटोमीटर की जटिल तकनीक को संभालने के लिए एक अनुभवी और उच्च योग्य ऑपरेटर की आवश्यकता होती है।काउंटस्टार रिगेल उपयोगकर्ताओं को पारंपरिक प्रवाह साइटोमेट्री से जुड़े संचालन और रखरखाव लागत के बिना आसानी से और सटीक रूप से ट्रांसफेक्शन दक्षता परख करने में सक्षम बनाता है।
सेल एपोप्टोसिस, 7-एडीडी के साथ संयोजन में एफआईटीसी संयुग्मित एनेक्सिन-वी का उपयोग करके सेल एपोप्टोसिस की प्रगति की निगरानी की जा सकती है।Phosphatidylserine (PS) अवशेष सामान्य रूप से स्वस्थ कोशिकाओं के प्लाज्मा झिल्ली के भीतरी भाग में स्थित होते हैं।प्रारंभिक एपोप्टोसिस के दौरान, झिल्ली अखंडता खो जाती है और पीएस को कोशिका झिल्ली के बाहर स्थानांतरित कर दिया जाएगा।एनेक्सिन वी में पीएस के लिए एक मजबूत संबंध है और इसलिए प्रारंभिक एपोप्टोटिक कोशिकाओं के लिए आदर्श मार्कर है।
कोशिका चक्र, कोशिका विभाजन के दौरान, कोशिकाओं में डीएनए की मात्रा बढ़ जाती है।पीआई द्वारा लेबल किया गया, प्रतिदीप्ति तीव्रता में वृद्धि डीएनए के संचय के सीधे आनुपातिक है।एकल कोशिकाओं की प्रतिदीप्ति तीव्रता में अंतर कोशिका चक्र की वास्तविक स्थिति के संकेतक हैं MCF 7 कोशिकाओं को उनके सेल चक्र के विभिन्न चरणों में इन कोशिकाओं को गिरफ्तार करने के लिए 4μM Nocodazole के साथ इलाज किया गया था।इस परीक्षण परिदृश्य के दौरान प्राप्त उज्ज्वल-क्षेत्र की छवियां हमें प्रत्येक एकल कोशिका की पहचान करने की अनुमति देती हैं।काउंटस्टार रिगेल का पीआई फ्लोरेसेंस चैनल समुच्चय में भी एकल कोशिकाओं के डीएनए संकेतों की पहचान करता है।FCS का उपयोग करके प्रतिदीप्ति तीव्रता का विस्तृत विश्लेषण किया जा सकता है।
सीडी मार्कर फेनोटाइपिंग, द काउंटस्टार रिगेल मॉडल कोशिकाओं के अधिक कुशल इम्यूनो-आधारित फेनोटाइपिंग के लिए एक तेज, सरल और अधिक संवेदनशील दृष्टिकोण प्रदान करते हैं।उच्च रिज़ॉल्यूशन छवियों और शक्तिशाली एकीकृत डेटा विश्लेषण क्षमताओं के साथ, काउंटस्टार रिगेल उपयोगकर्ताओं को व्यापक जटिल नियंत्रण सेटिंग्स और प्रतिदीप्ति क्षतिपूर्ति समायोजन की आवश्यकता के बिना लगातार विश्वसनीय परिणाम प्राप्त करने की अनुमति देता है।
साइटोकाइन इंड्यूस्ड किलर (CIK) सेल विभेदन उच्च श्रेणी प्रवाह साइटोमीटर की तुलना में काउंटस्टार रिगेल विश्लेषक की उत्कृष्ट प्रदर्शन गुणवत्ता को प्रदर्शित करता है।संस्कृति में माउस के PBMCs को CD3-FITC, CD4-PE, CD8-PE, और CD56-PE के साथ दाग दिया गया था, और इंटरल्यूकिन (IL) 6 द्वारा प्रेरित किया गया था। फिर काउंटस्टार® रिगेल और फ्लो साइटोमेट्री के साथ एक साथ विश्लेषण किया गया।इस परीक्षण में, CD3-CD4, CD3-CD8, और CD3-CD56 को विभिन्न सेल उप-जनसंख्या के अनुपात को निर्धारित करने के लिए तीन समूहों में विभाजित किया गया था।
इम्यूनोफ्लोरेसेंस द्वारा विकृत कोशिकाओं का पता लगाना, सेल लाइनों का उत्पादन करने वाले मोनोक्लोनल एंटीबॉडी सेल प्रसार के दौरान कुछ सकारात्मक क्लोन खो देंगे और गिरावट या आनुवंशिक उत्परिवर्तन के कारण पारित हो जाएंगे।एक उच्च नुकसान विनिर्माण प्रक्रिया की उत्पादकता को महत्वपूर्ण रूप से प्रभावित करेगा।एंटीबॉडी की उपज को इष्टतम में स्थानांतरित करने के लिए प्रक्रिया नियंत्रण में गिरावट की निगरानी एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाती है।
बायोफार्मा उद्योग में निर्मित अधिकांश एंटीबॉडी का पता इम्यूनोफ्लोरेसेंस लेबलिंग द्वारा लगाया जा सकता है और काउंटस्टार रिगेल श्रृंखला द्वारा मात्रात्मक रूप से विश्लेषण किया जा सकता है।नीचे दी गई उज्ज्वल-क्षेत्र और प्रतिदीप्ति चैनल छवियां उन क्लोनों को स्पष्ट रूप से दिखाती हैं जिन्होंने वांछित एंटीबॉडी का उत्पादन करने के लिए अपनी विशेषता खो दी है।डेनोवो एफसीएस एक्सप्रेस इमेज सॉफ्टवेयर के साथ अधिक विस्तृत विश्लेषण पुष्टि करता है कि सभी कोशिकाओं में से 86.35% इम्युनोग्लोबुलिन व्यक्त कर रहे हैं, केवल 3.34% स्पष्ट रूप से नकारात्मक हैं।
ट्रिपैन (ब्लू में बी को कैपिटलाइज़ करें) सेल काउंटिंग, ट्रिपैन ब्लू स्टेनिंग का उपयोग अभी भी अधिकांश सेल कल्चर लैब में किया जाता है।
ट्रिपैन ब्लू वायबिलिटी और सेल डेंसिटी बायोएप को सभी काउंटस्टार रिगेल मॉडल पर इंस्टॉल किया जा सकता है।हमारे संरक्षित छवि पहचान एल्गोरिदम का पता चला प्रत्येक एकल वस्तु को वर्गीकृत करने के लिए 20 से अधिक मापदंडों का विश्लेषण करते हैं।
सेल लाइन स्टोरेज क्यूसी, सेल स्टोरेज में, एक परिष्कृत गुणवत्ता प्रबंधन अवधारणा सभी सेलुलर उत्पादों की सुरक्षित, कुशल निगरानी सुनिश्चित करती है।यह प्रयोगों, प्रक्रिया विकास और उत्पादन के लिए क्रायो-संरक्षित, क्रायो-संरक्षित सेल की स्थिर गुणवत्ता की गारंटी देता है।
काउंटस्टार रिगेल उच्च-रिज़ॉल्यूशन छवियों को प्राप्त करता है, जो सेलुलर वस्तुओं जैसे व्यास, आकार और एकत्रीकरण प्रवृत्ति की विभिन्न रूपात्मक विशेषताओं का विश्लेषण करता है।विभिन्न प्रक्रिया चरणों की छवियों की एक दूसरे से आसानी से तुलना की जा सकती है।इसलिए व्यक्तिपरक मानव माप से बचकर, आकार और एकत्रीकरण में भिन्नता का आसानी से पता लगाया जा सकता है।और काउंटस्टार रिगेल डेटाबेस में छवियों और डेटा के भंडारण और पुनर्प्राप्ति के लिए एक परिष्कृत प्रबंधन प्रणाली है।
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