Comhcheanglaíonn an córas Countstar an cíteiméadar íomhá agus an t-áiritheoir cille in aon ionstraim barr-bhinse amháin.Soláthraíonn an córas íomháithe cille, dlúth agus uathoibrithe seo atá á thiomáint ag feidhmchlár réiteach uile-i-amháin do thaighde cille ailse, lena n-áirítear comhaireamh cille, inmharthanacht (AO/PI, trypan blue), apoptosis (Iarscríbhinn V-FITC/PI), cill. timthriall (PI), agus aistriú GFP/RFP.
Teibí
Tá ailse ar cheann de na príomhchúiseanna báis ar fud an domhain, agus tá tábhacht mhór ag baint le forbairt modhanna nua cóireála ailse.Is é cill ailse an bunchuspóir taighde ailse, ní mór faisnéis éagsúla a mheas ó na cille ailse.Tá anailís thapa, iontaofa, shimplí agus mhionsonraithe de dhíth ar an réimse taighde seo.Soláthraíonn córas Countstar ardán réitigh simplí le haghaidh anailíse cille ailse.
Déan staidéar ar Apoptosis Cille Ailse le Countstar Rigel
Úsáidtear measúnuithe apoptóis go rialta i go leor saotharlanna chun críocha éagsúla, ó shláinte na gcultúr cille a mheas go dtí tocsaineacht painéil chomhdhúile a mheas.
Is cineál é measúnacht apoptóis a úsáidtear chun céatadán apoptosis na gceall a chinneadh trí mhodh staining Annexin V-FITC/PI.Ceanglaíonn Iarscríbhinn V le fosfatidylserine (PS) le cill apoptóis luath nó cill necróis.Ní théann PI isteach ach cealla apoptotic necrotic/céim an-déanach.(Fíor 1)
A: Apoptosis luath Aguisín V (+), PI (-)
B:Apoptosis déanach Iarscríbhinn V (+), PI (+)
Figiúr 1: Sonraí méadaithe pictiúir Countstar Rigel (5 x formhéadú) de 293 cill, cóireáilte le Annexin V FITC agus PI
Anailís Timthriall Cille ar Chill Ailse
Is é is timthriall cille nó timthriall rannán cille an tsraith imeachtaí a tharlaíonn i gcill as a dtagann a roinnt agus a dhúbailt DNA (macasamhlú DNA) a tháirgeadh dhá cealla iníon.I gcealla le núicléas, mar atá in eukaryotes, roinntear an timthriall cille i dtrí thréimhse freisin: interphase, an chéim mitotic (M), agus cytokinesis.Is dath staining núicléach é iaidíd própidiam (PI) a úsáidtear go minic chun timthriall cille a thomhas.Toisc nach féidir leis an ruaim dul isteach i gcealla beo, socraítear na cealla le eatánól roimh staining.Déantar na cealla ar fad a dhaite ansin.Beidh méideanna méadaithe DNA i gcealla atá ag ullmhú le haghaidh deighilte agus léireoidh siad fluaraiseacht méadaithe go comhréireach.Úsáidtear difríochtaí i ndéine fluaraiseachta chun céatadán na gcealla i ngach céim den timthriall cille a chinneadh.Is féidir le Countstar an íomhá a ghabháil agus taispeánfar na torthaí i mbogearraí FCS express.(Fíor 2)
Fíor 2: Rinneadh MCF-7 (A) agus 293T (B) a dhaite le Kit Braite timthriall cille le PI, chinn Countstar Rigel na torthaí, agus rinne FCS express anailís orthu.
Inmharthanacht agus Cinneadh Aistrithe GFP i gCill
Le linn an bhithphróisis, is minic a úsáidtear GFP chun próitéin athchuingreach a chomhleá mar tháscaire.Socraigh an féidir fluaraiseacha GFP léiriú ar an abairt próitéin sprioc.Cuireann Countstar Rigel measúnú tapa agus simplí ar fáil chun aistriú GFP a thástáil chomh maith le hinmharthanacht.Bhí dhaite cealla le iaidíd Propidium (PI) agus Hoechst 33342 chun daonra na gceall marbh agus daonra iomlán na gceall a shainiú.Cuireann Countstar Rigel modh tapa, cainníochtúil ar fáil chun éifeachtúlacht agus inmharthanacht slonn GFP a mheas ag an am céanna.(Fíor 4)
Fíor 4: Tá cealla suite ag baint úsáide as Hoechst 33342 (gorm) agus is féidir an céatadán de chealla in iúl GFP (glas) a chinneadh go héasca.Tá cill neamh-inmharthana dhaite le iaidíd propidium (PI; dearg).
Inmharthanacht agus Líon na gCeall
AO/PI Is é comhaireamh défhluaraisí an cineál measúnaithe a úsáidtear chun tiúchan cille, inmharthanacht a bhrath.Roinneadh sé ina chomhaireamh líne cille agus comhaireamh cille príomhúil de réir cineál cille éagsúla.Tá meascán de stain aigéad núicléach glas-fluaraiseacha, oráiste acridine, agus an stain aigéad núicléach deargfluaraiseacha, iaidíd propidium.Is dath eisiaimh membrane é iaidíd própidiam nach dtéann isteach ach i gcealla le seicní comhréiteach agus téann oráiste aicridín isteach i ngach cealla sa daonra.Nuair a bhíonn an dá ruaim i láthair sa núicléas, bíonn iaidíd propidium ina chúis le laghdú ar fhluaraiseacht oráiste acridine trí aistriú fuinnimh athshondais fhluaraiseachta (FRET).Mar thoradh air sin, stainníonn cealla núiclithe le seicní slána glas fluaraiseacha agus áireofar iad mar bheocht, ach ní stainseálann cealla núicléacha le seicní comhréiteach ach dearg fluaraiseacha agus meastar go bhfuil siad marbh nuair a úsáidtear an córas Countstar Rigel.Ní fhluaraisíonn ábhar neamhnúicléach ar nós cealla fola dearga, pláitíní agus smionagar agus ní thugann bogearraí Countstar Rigel aird orthu.(Fíor 5)
Fíor 5: Tá modh staining défhluaraiseachta optamaithe ag Countstar chun tiúchan agus inmharthanacht PBMC a chinneadh go simplí cruinn.Is féidir samplaí daite le AO/PI a anailísiú leis an Counstar Rigel
