Cartref » Ceisiadau » Cymwysiadau Countstar mewn ymchwil celloedd canser

Cymwysiadau Countstar mewn ymchwil celloedd canser

Mae system Countstar yn cyfuno'r sytomedr delwedd a'r rhifydd cell yn un offeryn pen mainc.Mae'r system delweddu celloedd awtomataidd, gryno ac awtomataidd hon sy'n cael ei gyrru gan gais yn darparu datrysiad popeth-mewn-un ar gyfer ymchwil celloedd canser, gan gynnwys cyfrif celloedd, hyfywedd (AO / PI, trypan glas), apoptosis (Atodiad V-FITC / PI), cell cylchred (DP), a thrawsnewidiad GFP/RFP.

Haniaethol

Canser yw un o brif achosion marwolaeth ledled y byd, ac mae datblygu dulliau trin canser newydd yn arwyddocaol iawn.Cell canser yw gwrthrych ymchwil sylfaenol canser, mae angen gwerthuso gwybodaeth amrywiol o'r gell canser.Mae angen dadansoddiad celloedd cyflym, dibynadwy, syml a manwl ar y maes ymchwil hwn.Mae system Countstar yn darparu llwyfan datrysiad syml ar gyfer dadansoddi celloedd canser.

 

Astudiwch Apoptosis Celloedd Canser gan Countstar Rigel

Defnyddir profion apoptosis fel mater o drefn mewn llawer o labordai at ddibenion amrywiol, o asesu iechyd diwylliannau celloedd i werthuso gwenwyndra panel o gyfansoddion.
Mae assay apoptosis yn fath a ddefnyddir ar gyfer pennu canran apoptosis o gelloedd trwy ddull staenio Annexin V-FITC/PI.Mae Atodiad V yn rhwymo i phosphatidylserine (PS) gyda chell apoptosis cynnar neu gell necrosis.Dim ond celloedd apoptotig necrotig/cam hwyr iawn y mae PI yn mynd i mewn iddynt.(Ffigur 1)

 

A: Apoptosis cynnar Atodiad V (+), PI (-)

 

B: apoptosis hwyr Atodiad V (+), PI (+)

 

Ffigur 1: Manylion mwy o luniau Countstar Rigel (5 x chwyddo) o 293 o gelloedd, wedi'u trin ag Annexin V FITC a PI

 

 

Dadansoddiad Cylchred Cell o Ganser Cell

Y gylchred gell neu'r gylchred rhannu cell yw'r gyfres o ddigwyddiadau sy'n digwydd mewn cell sy'n arwain at rannu a dyblygu ei DNA (dyblygiad DNA) i gynhyrchu dwy epilgell.Mewn celloedd â chnewyllyn, fel mewn ewcaryotau, mae'r gylchred gell hefyd wedi'i rhannu'n dri chyfnod: interphase, y cyfnod mitotig (M), a cytocinesis.Lliw staenio niwclear yw propidium ïodid (PI) a ddefnyddir yn aml i fesur cylchred celloedd.Oherwydd na all y llifyn fynd i mewn i gelloedd byw, caiff y celloedd eu gosod ag ethanol cyn eu staenio.Yna mae pob un o'r celloedd yn cael eu staenio.Bydd celloedd sy'n paratoi ar gyfer rhannu yn cynnwys symiau cynyddol o DNA ac yn dangos fflworoleuedd uwch yn gymesur.Defnyddir gwahaniaethau mewn dwyster fflworoleuedd i bennu canran y celloedd ym mhob cam o'r gylchred gell.Gall Countstar ddal y ddelwedd a bydd y canlyniadau'n cael eu harddangos mewn meddalwedd cyflym FCS.(Ffigur 2)

 

Ffigur 2: Cafodd MCF-7 (A) a 293T (B) eu staenio â Phecyn Canfod cylchred celloedd gyda DP, pennwyd y canlyniadau gan Countstar Rigel, a'u dadansoddi gan FCS express.

 

Hyfywedd a Phenderfyniad Trawsnewid GFP mewn Cell

Yn ystod y biobroses, defnyddir GFP yn aml i asio â phrotein ailgyfunol fel dangosydd.Penderfynu ar y fflwroleuol GFP yn gallu adlewyrchu'r mynegiant protein targed.Mae Countstar Rigel yn cynnig assay cyflym a syml ar gyfer profi trawsnewidiad GFP yn ogystal â hyfywedd.Cafodd celloedd eu staenio â Propidium ïodide (PI) a Hoechst 33342 i ddiffinio'r boblogaeth celloedd marw a chyfanswm poblogaeth celloedd.Mae Countstar Rigel yn cynnig dull cyflym, meintiol ar gyfer gwerthuso effeithlonrwydd a hyfywedd mynegiant GFP ar yr un pryd.(Ffigur 4)

 

Ffigur 4: Mae celloedd wedi'u lleoli gan ddefnyddio Hoechst 33342 (glas) a gellir pennu canran y celloedd mynegi GFP (gwyrdd) yn hawdd.Mae celloedd anhyfyw wedi'u staenio â propidium ïodid (PI; coch).

 

Hyfywedd a Chyfrif Celloedd

AO/PI Cyfrif fflworoleuol deuol yw'r math assay a ddefnyddir ar gyfer canfod crynodiad celloedd, hyfywedd.Fe'i rhannodd yn gyfrif llinell gell a chyfrif celloedd cynradd yn ôl gwahanol fathau o gell.Mae'r ateb yn cynnwys cyfuniad o'r staen asid niwclëig gwyrdd-fflworoleuol, oren acridine, a'r staen asid niwclëig coch fflwroleuol, propidium ïodid.Mae propidium ïodid yn lliw allgáu pilen sydd ond yn mynd i mewn i gelloedd â philenni cyfaddawdu tra bod oren acridine yn treiddio i bob cell mewn poblogaeth.Pan fydd y ddau liw yn bresennol yn y cnewyllyn, mae propidium ïodid yn achosi gostyngiad mewn fflworoleuedd oren acridine trwy drosglwyddiad egni cyseiniant fflworoleuedd (FRET).O ganlyniad, mae celloedd cnewyllol â philenni cyfan yn staenio'n wyrdd fflwroleuol ac yn cael eu cyfrif fel rhai byw, tra bod celloedd cnewyllol â philenni dan fygythiad yn staenio coch fflwroleuol yn unig ac yn cael eu cyfrif yn farw wrth ddefnyddio system Countstar Rigel.Nid yw deunydd nad yw'n gnewyllol fel celloedd coch y gwaed, platennau a malurion yn fflworoleuol ac maent yn cael eu hanwybyddu gan feddalwedd Countstar Rigel.(Ffigur 5)

 

Ffigur 5: Mae Countstar wedi optimeiddio dull staenio fflworoleuedd deuol ar gyfer pennu crynodiad a hyfywedd PBMC yn syml ac yn gywir.Gellir dadansoddi samplau sydd wedi'u staenio ag AO/PI gyda'r Counstar Rigel

 

 

Mae eich preifatrwydd yn bwysig i ni.

Rydym yn defnyddio cwcis i wella eich profiad wrth ymweld â'n gwefannau: mae cwcis perfformiad yn dangos i ni sut rydych chi'n defnyddio'r wefan hon, mae cwcis swyddogaethol yn cofio'ch dewisiadau ac mae cwcis targedu yn ein helpu i rannu cynnwys sy'n berthnasol i chi.

Derbyn

Mewngofnodi