A kettős fluoreszcens életképesség (AO/PI), az akridinnarancs (AO) és a propidium-jodid (PI) nukleinsavfestő és savkötő festékek.Az AO áthatolhat az elhalt és az élő sejtek membránján, és megfesti a sejtmagot, zöld fluoreszcenciát generálva.Ezzel szemben a PI csak az elhalt magvú sejtek széteső membránjain képes áthatolni, vörös fluoreszcenciát generálva.A Countstar Rigel képalapú technológiája kizárja a sejttöredékeket, törmeléket és műtermékrészecskéket, valamint az alulméretezett eseményeket, például a vérlemezkéket, így rendkívül pontos eredményt ad.Összefoglalva, a Countstar Rigel rendszer a cellagyártási folyamat minden lépésében használható.

T/NK sejt által közvetített citotoxicitás, az FDA által nemrégiben jóváhagyott CAR-T sejtterápiában a genetikailag módosított T-limfociták specifikusan kötődnek a megcélzott rákos sejtekhez (T), és elpusztítják azokat.A Countstar Rigel analizátorok képesek elemezni a T/NK sejt által közvetített citotoxicitás teljes folyamatát.

A citotoxicitási vizsgálatokat a célráksejtek CFSE-vel történő jelölésével vagy GFP-vel történő transzfektálásával végzik.A Hoechst 33342 minden sejt (T-sejtek és daganatsejtek) festésére használható.Alternatív megoldásként a céltumorsejteket meg lehet festeni CFSE-vel.A propidium-jodidot (PI) az elhalt sejtek (mind a T-sejtek, mind a tumorsejtek) megfestésére használják.Ezzel a festési stratégiával megkülönböztethető a különböző sejtek.

GFP transzfekció hatékonysága, a molekuláris genetikában, a különböző modellszervezetekben és a sejtbiológiában a GFP gént gyakran használják riporterként expressziós vizsgálatokhoz.Jelenleg a tudósok általában fluoreszcens mikroszkópokat vagy áramlási citométereket használnak az emlőssejtek transzfekciós hatékonyságának elemzésére.A fejlett áramlási citométer komplex technológiájának kezelése azonban tapasztalt és magasan képzett kezelőt igényel.A Countstar Rigel lehetővé teszi a felhasználók számára, hogy egyszerűen és pontosan végezzenek transzfekciós hatékonysági vizsgálatot a hagyományos áramlási citometriához kapcsolódó üzemeltetési és karbantartási költségek nélkül.

Sejtapoptózis, A sejt apoptózis előrehaladása FITC-vel konjugált Annexin-V-vel 7-ADD-vel kombinálva követhető.A foszfatidil-szerin (PS) maradékok általában az egészséges sejtek plazmamembránjának belső oldalán találhatók.A korai apoptózis során a membrán integritása elveszik, és a PS a sejtmembránon kívülre kerül.Az Annexin V erős affinitást mutat a PS-hez, ezért ideális markere a korai apoptotikus sejtek számára.

Sejtciklus, A sejtosztódás során a sejtek megnövekedett mennyiségű DNS-t tartalmaznak.A PI-vel jelölt fluoreszcencia intenzitás növekedése egyenesen arányos a DNS felhalmozódásával.Az egyes sejtek fluoreszcencia intenzitásának különbségei a sejtciklus aktuális állapotát jelzik. Az MCF 7 sejteket 4 µM Nocodazollal kezeltük, hogy megállítsuk ezeket a sejteket sejtciklusuk különböző szakaszaiban.A tesztforgatókönyv során kapott világos mezős képek lehetővé teszik az egyes cellák azonosítását.A Countstar Rigel PI fluoreszcencia csatornája az egyes sejtek DNS-jeleit akár aggregátumokban is azonosítja.A fluoreszcencia intenzitásának részletes elemzése elvégezhető az FCS segítségével.

CD Marker fenotipizálás, A Countstar Rigel modellek gyorsabb, egyszerűbb és érzékenyebb megközelítést kínálnak a sejtek immunoalapú fenotipizálásához, hatékonyabban.A nagy felbontású képekkel és a hatékony integrált adatelemzési képességekkel a Countstar Rigel lehetővé teszi a felhasználók számára, hogy folyamatosan megbízható eredményeket érjenek el anélkül, hogy kiterjedt komplex vezérlési beállításokra és fluoreszcencia kompenzációra lenne szükség.

A Cytokin Induced Killer (CIK) sejtdifferenciálódás bizonyítja a Countstar Rigel analizátor kiemelkedő teljesítményét a magas osztályú áramlási citométerekhez képest.A tenyészetben lévő egér PBMC-ket CD3-FITC-vel, CD4-PE-vel, CD8-PE-vel és CD56-PE-vel festettük, és interleukin (IL) 6-tal indukáltuk. Ezután egyidejűleg elemeztük Countstar® Rigel és Flow Cytometry segítségével.Ebben a tesztben a CD3-CD4-et, a CD3-CD8-at és a CD3-CD56-ot három csoportra osztották, hogy meghatározzák a különböző sejtalpopulációk arányát.

A degenerált sejtek kimutatása immunfluoreszcenciával. A monoklonális antitesteket termelő sejtvonalak elveszítenek néhány pozitív klónt a sejtproliferáció és áthaladás során a degradáció vagy genetikai mutációk miatt.A nagyobb veszteség jelentősen befolyásolja a gyártási folyamat termelékenységét.A lebomlás monitorozása fontos szerepet játszik a folyamatszabályozásban, hogy az antitestek hozamát az optimálisra tolják el.

A BioPharma iparban gyártott antitestek többsége immunfluoreszcens jelöléssel kimutatható és a Countstar Rigel sorozattal kvantitatívan elemezhető.Az alábbi világosmezős és fluoreszcens csatornás képek egyértelműen mutatják azokat a klónokat, amelyek elvesztették tulajdonságukat a kívánt antitestek előállításához.A DeNovo FCS Express Image szoftverrel végzett részletesebb elemzés megerősíti, hogy az összes sejt 86,35%-a expresszálja az immunglobulinokat, mindössze 3,34%-a egyértelműen negatív.

Trypán (Kék nagybetűvel írjuk a B-t) Sejtszámlálás, A tripánkék festést a legtöbb sejttenyésztő laboratóriumban még mindig használják.

A Trypan Blue Viability és Cell Density BioApp minden Countstar Rigel modellre telepíthető.Védett képfelismerő algoritmusaink több mint 20 paramétert elemeznek az egyes észlelt objektumok osztályozása érdekében.

Cell Line Storage QC, A cellás tárolásban egy kifinomult minőségirányítási koncepció biztosítja az összes cellás termék biztonságos és hatékony felügyeletét.Ez garantálja a kísérletekhez, folyamatfejlesztéshez és gyártáshoz szükséges mélyhűtött, kriokonzervált sejt stabil minőségét.

A Countstar Rigel nagy felbontású képeket készít, elemezve a sejtes objektumok különféle morfológiai jellemzőit, például átmérőt, alakot és aggregációs hajlamot.A különböző folyamatlépések képei könnyen összehasonlíthatók egymással.Így a szubjektív emberi mérések elkerülésével az alakváltozások és az aggregáció könnyen kimutatható.A Countstar Rigel adatbázis pedig kifinomult felügyeleti rendszerrel rendelkezik a képek és adatok tárolására és visszakeresésére.