Duální fluorescenční životaschopnost (AO/PI), akridinová oranž (AO) a propidium jodid (PI) jsou barviva na bázi jaderných jader a barviva vázající kyseliny.AO může proniknout membránou mrtvých i živých buněk a barvit jádro, čímž vzniká zelená fluorescence.Naproti tomu PI může pronikat pouze dezintegrujícími se membránami mrtvých jaderných buněk a generovat červenou fluorescenci.Technologie Countstar Rigel založená na obrazu vylučuje buněčné fragmenty, úlomky a částice artefaktů, stejně jako události s nízkou velikostí, jako jsou krevní destičky, což poskytuje vysoce přesný výsledek.Závěrem lze říci, že systém Countstar Rigel lze použít pro každý krok procesu výroby článku.

Cytotoxicita zprostředkovaná T/NK buňkami, V nedávno schválené FDA buněčné terapii CAR-T se geneticky upravené T-lymfocyty specificky vážou na cílené rakovinné buňky (T) a zabíjejí je.Analyzátory Countstar Rigel jsou schopny analyzovat tento kompletní proces cytotoxicity zprostředkované T/NK buňkami.

Studie cytotoxicity se provádějí značením cílových rakovinných buněk pomocí CFSE nebo jejich transfekcí pomocí GFP.Hoechst 33342 lze použít k barvení všech buněk (jak T buněk, tak nádorových buněk).Alternativně mohou být cílové nádorové buňky barveny pomocí CFSE.Propidium jodid (PI) se používá k barvení mrtvých buněk (jak T buněk, tak nádorových buněk).Pomocí této strategie barvení lze dosáhnout rozlišení mezi různými buňkami.

Účinnost transfekce GFP, V molekulární genetice, různých modelových organismech a buněčné biologii se gen GFP často používá jako reportér pro studie exprese.V současné době vědci běžně používají fluorescenční mikroskopy nebo průtokové cytometry k analýze účinnosti transfekce savčích buněk.Ale zvládnutí složité technologie pokročilého průtokového cytometru vyžaduje zkušenou a vysoce kvalifikovanou obsluhu.Countstar Rigel umožňuje uživatelům snadno a přesně provádět test účinnosti transfekce bez nákladů na provoz a údržbu spojených s tradiční průtokovou cytometrií.

Buněčná apoptóza, Postup buněčné apoptózy může být monitorován pomocí FITC konjugovaného annexinu-V v kombinaci s 7-ADD.Zbytky fosfatidylserinu (PS) jsou normálně umístěny na vnitřní straně plazmatické membrány zdravých buněk.Během časné apoptózy se integrita membrány ztratí a PS bude translokován na vnější stranu buněčné membrány.Annexin V má silnou afinitu k PS a je proto ideálním markerem pro časné apoptotické buňky.

Buněčný cyklus, Během buněčného dělení obsahují buňky zvýšené množství DNA.Značeno PI, zvýšení intenzity fluorescence je přímo úměrné akumulaci DNA.Rozdíly v intenzitách fluorescence jednotlivých buněk jsou indikátory skutečného stavu buněčného cyklu Buňky MCF 7 byly ošetřeny 4 μM nocodazolu, aby se tyto buňky zastavily v různých fázích jejich buněčného cyklu.Snímky ve světlém poli získané během tohoto testovacího scénáře nám umožňují identifikovat každou jednotlivou buňku.PI fluorescenční kanál Countstar Rigel identifikuje DNA signály jednotlivých buněk i v agregátech.Podrobnou analýzu intenzit fluorescence lze provést pomocí FCS.

Fenotypizace CD markerů, Modely Countstar Rigel nabízejí rychlejší, jednodušší a citlivější přístup k efektivnějšímu fenotypování buněk na základě imunity.S obrázky s vysokým rozlišením a výkonnými integrovanými možnostmi analýzy dat umožňuje Countstar Rigel uživatelům dosahovat trvale spolehlivých výsledků bez nutnosti rozsáhlého komplexního nastavení řízení a úprav fluorescenční kompenzace.

Cytokine Induced Killer (CIK) buněčná diferenciace demonstruje vynikající výkonnost analyzátoru Countstar Rigel v přímém srovnání s průtokovými cytometry vysoké třídy.PBMC myší v kultuře byly obarveny CD3-FITC, CD4-PE, CD8-PE a CD56-PE a indukovány interleukinem (IL) 6. Poté byly analyzovány současně pomocí Countstar® Rigel a průtokové cytometrie.V tomto testu byly CD3-CD4, CD3-CD8 a CD3-CD56 rozděleny do tří skupin, aby se určil podíl různých buněčných subpopulací.

Detekce degenerovaných buněk imunofluorescencí, monoklonální protilátky produkující buněčné linie ztratí některé pozitivní klony během buněčné proliferace a pasážování v důsledku degradace nebo genetických mutací.Vyšší ztráta výrazně ovlivní produktivitu výrobního procesu.Monitorování degradace hraje důležitou roli v řízení procesu, aby se výtěžek protilátek posunul k optimu.

Většina protilátek vyráběných v průmyslu BioPharma může být detekována imunofluorescenčním značením a kvantitativně analyzována řadou Countstar Rigel.Obrázky ve světlém poli a fluorescenční kanál níže jasně ukazují ty klony, které ztratily svůj atribut produkovat požadované protilátky.Podrobnější analýza pomocí softwaru DeNovo FCS Express Image potvrzuje, že 86,35 % všech buněk exprimuje imunoglobuliny, pouze 3,34 % je jasně negativních.

Trypan (velké písmeno B modře) Počítání buněk, barvení trypanovou modří se stále používá ve většině laboratoří buněčných kultur.

Aplikace Trypan Blue Viability a Cell Density BioApp lze nainstalovat na všechny modely Countstar Rigel.Naše algoritmy pro rozpoznávání chráněného obrazu analyzují více než 20 parametrů pro klasifikaci každého jednotlivého detekovaného objektu.

Cell Line Storage QC, V oblasti buněčného úložiště sofistikovaný koncept řízení kvality zajišťuje bezpečné a efektivní monitorování všech celulárních produktů.To zaručuje stabilní kvalitu buněk kryokonzervovaných, kryokonzervovaných pro experimenty, vývoj procesů a výrobu.

Countstar Rigel získává snímky s vysokým rozlišením a analyzuje různé morfologické charakteristiky buněčných objektů, jako je průměr, tvar a tendence k agregaci.Obrázky různých kroků procesu lze snadno vzájemně porovnávat.Takže odchylky ve tvaru a agregaci lze snadno detekovat tím, že se vyhneme subjektivním lidským měřením.A databáze Countstar Rigel má propracovaný systém správy pro ukládání a vyhledávání obrázků a dat.