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Para terapia de células CAR-T

  • 1.Colección
  • 2. Aislamiento
  • 3. Modificación
  • 4.Expansión
  • 5. Cosecha
  • 6. control de calidad del producto
  • 7.Tratamiento

Lo que podemos hacer

  • Viabilidad AO/PI
  • Citotoxicidad celular
  • Eficiencia de transfección
  • Apoptosis Celular
  • Ciclo celular
  • Marcador de CD
  • Células Degeneradas
  • Conteo de células
  • Línea celular
AO/PI Viability
Viabilidad AO/PI

La viabilidad de fluorescencia dual (AO/PI), el naranja de acridina (AO) y el yoduro de propidio (PI) son colorantes nucleicos nucleares y colorantes de unión a ácidos.AO puede penetrar la membrana de las células vivas y muertas y tiñe el núcleo, generando una fluorescencia verde.Por el contrario, el PI solo puede penetrar las membranas en desintegración de las células nucleadas muertas, generando una fluorescencia roja.La tecnología basada en imágenes de excluye fragmentos de células, desechos y partículas de artefactos, así como eventos de tamaño insuficiente, como plaquetas, lo que brinda un resultado de alta precisión.En conclusión, el sistema se puede utilizar para cada paso del proceso de fabricación de células.

Cell Cytotoxicity
Citotoxicidad celular

Citotoxicidad mediada por células T/NK. En la terapia de células CAR-T recientemente aprobada por la FDA, los linfocitos T modificados genéticamente se unen específicamente a las células cancerosas (T) objetivo y las eliminan.Los analizadores son capaces de analizar este proceso completo de citotoxicidad mediada por células T/NK.

Los estudios de citotoxicidad se realizan marcando las células cancerosas diana con CFSE o transfectándolas con GFP.Hoechst 33342 se puede utilizar para teñir todas las células (tanto las células T como las células tumorales).Como alternativa, las células tumorales diana se pueden teñir con CFSE.El yoduro de propidio (PI) se usa para teñir las células muertas (tanto las células T como las células tumorales).La discriminación entre diferentes células se puede obtener utilizando esta estrategia de tinción.

Transfection Efficiency
Eficiencia de transfección

Eficiencia de transfección de GFP, en genética molecular, varios organismos modelo y biología celular, el gen GFP se usa con frecuencia como indicador para estudios de expresión.En la actualidad, los científicos suelen utilizar microscopios fluorescentes o citómetros de flujo para analizar la eficacia de la transfección de células de mamíferos.Pero manejar la tecnología compleja de un citómetro de flujo avanzado exige un operador experimentado y altamente calificado. permite a los usuarios realizar de manera fácil y precisa un ensayo de eficiencia de transfección sin los costos de operación y mantenimiento asociados con la citometría de flujo tradicional.

Cell Apoptosis
Apoptosis Celular

Apoptosis celular, el progreso de la apoptosis celular se puede monitorear usando Anexina-V conjugada con FITC en combinación con 7-ADD.Los residuos de fosfatidilserina (PS) normalmente se encuentran en el lado interno de la membrana plasmática de las células sanas.Durante la apoptosis temprana, la integridad de la membrana se pierde y la PS se trasladará al exterior de la membrana celular.La anexina V tiene una fuerte afinidad por la PS y, por lo tanto, es el marcador ideal para las células apoptóticas tempranas.

Cell Cycle
Ciclo celular

Ciclo celular, durante la división celular, las células contienen mayores cantidades de ADN.Marcado por PI, un aumento en la intensidad de la fluorescencia es directamente proporcional a una acumulación de ADN.Las diferencias en las intensidades de fluorescencia de las células individuales son los indicadores del estado real del ciclo celular Se trataron células MCF 7 con 4 μM de nocodazol para detener estas células en diferentes etapas de su ciclo celular.Las imágenes de campo claro adquiridas durante este escenario de prueba nos permiten identificar cada celda individual.El canal de fluorescencia PI del identifica las señales de ADN de células individuales incluso en agregados.Se puede realizar un análisis detallado de las intensidades de fluorescencia utilizando el FCS.

CD Marker
Marcador de CD

Fenotipado de marcador de CD, los modelos ofrecen un enfoque más rápido, más simple y más sensible para el fenotipado de células basado en inmunología más eficiente.Con imágenes de alta resolución y poderosas capacidades integradas de análisis de datos, permite a los usuarios lograr resultados consistentemente confiables sin la necesidad de configuraciones de control extensas y complejas y ajustes de compensación de fluorescencia.

La diferenciación de células asesinas inducidas por citoquinas (CIK) demuestra la excelente calidad de rendimiento del analizador en comparación directa con los citómetros de flujo de clase alta.Las PBMC de ratón en cultivo se tiñeron con CD3-FITC, CD4-PE, CD8-PE y CD56-PE, y se indujeron con interleucina (IL) 6. Luego se analizaron simultáneamente con Countstar® Rigel y citometría de flujo.En esta prueba, el CD3-CD4, el CD3-CD8 y el CD3-CD56 se dividieron en tres grupos para determinar la proporción de diferentes subpoblaciones celulares.

Degenerated Cells
Células Degeneradas

Detección de células degeneradas por inmunofluorescencia, las líneas celulares que producen anticuerpos monoclonales perderán algunos clones positivos durante la proliferación celular y el paso debido a la degradación o mutaciones genéticas.Una pérdida mayor afectará significativamente la productividad del proceso de fabricación.El seguimiento de la degradación juega un papel importante en el control del proceso para llevar el rendimiento de anticuerpos al nivel óptimo.

La mayoría de los anticuerpos fabricados en la industria biofarmacéutica pueden detectarse mediante marcaje de inmunofluorescencia y analizarse cuantitativamente mediante la serie .Las imágenes de campo claro y canal de fluorescencia a continuación muestran claramente aquellos clones que perdieron su atributo para producir los anticuerpos deseados.El análisis más detallado con el software DeNovo FCS Express Image confirma que el 86,35 % de todas las células expresan las inmunoglobulinas, solo el 3,34 % son claramente negativas.

Cell Counting
Conteo de células

Recuento de células Trypan (en mayúscula B en azul), la tinción con azul Trypan todavía se usa en la mayoría de los laboratorios de cultivo celular.

La bioaplicación Trypan Blue Viability and Cell Density se puede instalar en todos los modelos .Nuestros algoritmos de reconocimiento de imágenes protegidas analizan más de 20 parámetros para clasificar cada objeto detectado.

Cell Line
Línea celular

Cell Line Storage QC, en el almacenamiento de celdas, un sofisticado concepto de gestión de calidad garantiza un control seguro y eficiente de todos los productos celulares.Esto garantiza la calidad estable de las células crioconservadas, crioconservadas para experimentos, desarrollo de procesos y producción.

adquiere imágenes de alta resolución, analizando varias características morfológicas de los objetos celulares, como el diámetro, la forma y la tendencia a la agregación.Las imágenes de los diferentes pasos del proceso se pueden comparar fácilmente entre sí.Por lo tanto, las variaciones en la forma y la agregación se pueden detectar fácilmente, evitando las mediciones humanas subjetivas.Y la base de datos tiene un sofisticado sistema de gestión para el almacenamiento y recuperación de imágenes y datos.

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