Жыццяздольнасць падвойнай флуарэсцэнцыі (AO/PI), акрыдынавы аранжавы (AO) і ёдыд пропидия (PI) з'яўляюцца фарбавальнікамі ядзерных нуклеінаў і кіслотамі, якія звязваюць фарбы.АО можа пранікаць праз мембрану як мёртвых, так і жывых клетак і афарбоўвае ядро, ствараючы зялёную флуарэсцэнцыю.Наадварот, PI можа пранікаць толькі ў распадаюцца мембраны мёртвых ядравых клетак, ствараючы чырвоную флуарэсцэнцыю.Тэхналогія Countstar Rigel, заснаваная на выявах, выключае фрагменты клетак, абломкі і часціцы артэфактаў, а таксама невялікія падзеі, такія як трамбацыты, што дае вельмі дакладны вынік.У заключэнне, сістэму Countstar Rigel можна выкарыстоўваць на кожным этапе працэсу вытворчасці клетак.

T/NK клетка-апасродкаваная цытатаксічнасць. У нядаўна зацверджанай FDA клеткавай тэрапіі CAR-T генна-інжынерныя Т-лімфацыты звязваюцца з мэтавымі ракавымі клеткамі (Т) і забіваюць іх.Аналізатары Countstar Rigel здольныя прааналізаваць гэты поўны працэс апасродкаванай T/NK клеткамі цытатаксічнасці.

Даследаванні цытатоксічнасці праводзяцца шляхам маркіроўкі ракавых клетак-мішэняў CFSE або трансфекции іх GFP.Hoechst 33342 можна выкарыстоўваць для афарбоўкі ўсіх клетак (як Т-клетак, так і опухолевых клетак).Акрамя таго, опухолевые клеткі-мішэні можна афарбаваць CFSE.Ёдыд пропидия (PI) выкарыстоўваецца для афарбоўкі мёртвых клетак (як Т-клетак, так і опухолевых клетак).З дапамогай гэтай стратэгіі афарбоўвання можна атрымаць адрозненні паміж рознымі клеткамі.

Эфектыўнасць трансфекцыі GFP, у малекулярнай генетыцы, розных мадэльных арганізмах і клетачнай біялогіі ген GFP часта выкарыстоўваецца ў якасці рэпарцёра для даследаванняў экспрэсіі.У цяперашні час навукоўцы звычайна выкарыстоўваюць флуоресцентные мікраскопы або праточныя цытометры для аналізу эфектыўнасці трансфекции клетак млекакормячых.Але апрацоўка складанай тэхналогіі сучаснага праточнага цытометра патрабуе вопытнага і высокакваліфікаванага аператара.Countstar Rigel дазваляе карыстальнікам лёгка і дакладна выконваць аналіз эфектыўнасці трансфекцыі без выдаткаў на эксплуатацыю і тэхнічнае абслугоўванне, звязаных з традыцыйнай праточнай цытаметрыяй.

Апоптоз клетак. За ходам апоптоза клетак можна кантраляваць з дапамогай кан'югаванага FITC анексіну-V у спалучэнні з 7-ADD.Рэшткі фосфатидилсерина (PS) звычайна размешчаны на ўнутраным баку плазматычнай мембраны здаровых клетак.Падчас ранняга апоптоза цэласнасць мембраны губляецца, і PS будзе перанесены на знешні бок клеткавай мембраны.Анексін V мае моцнае сродство да PS і таму з'яўляецца ідэальным маркерам для ранніх апоптотических клетак.

Клеткавы цыкл, падчас дзялення клеткі клеткі ўтрымліваюць павышаную колькасць ДНК.Пазначана PI, павелічэнне інтэнсіўнасці флуарэсцэнцыі прама прапарцыйна назапашвання ДНК.Адрозненні ў інтэнсіўнасці флуарэсцэнцыі асобных клетак з'яўляюцца паказчыкамі фактычнага стану клеткавага цыклу. Клеткі MCF 7 апрацоўвалі 4 мкМ нокодазола, каб спыніць гэтыя клеткі на розных стадыях клеткавага цыклу.Выявы ў яркім полі, атрыманыя падчас гэтага тэставага сцэнара, дазваляюць нам ідэнтыфікаваць кожную асобную клетку.Канал флуоресценции PI Countstar Rigel ідэнтыфікуе сігналы ДНК асобных клетак нават у агрэгатах.Дэталёвы аналіз інтэнсіўнасці флуарэсцэнцыі можна правесці з дапамогай FCS.

Фенатыпаванне CD-маркераў, мадэлі Countstar Rigel прапануюць больш хуткі, просты і больш адчувальны падыход да больш эфектыўнага імуна-фенатыпавання клетак.З выявамі з высокім разрозненнем і магутнымі інтэграванымі магчымасцямі аналізу дадзеных, Countstar Rigel дазваляе карыстальнікам атрымліваць стабільна надзейныя вынікі без неабходнасці шырокіх налад кіравання і налады кампенсацыі флуарэсцэнцыі.

Дыферэнцыяцыя клетак, выкліканых цытокінамі-забойцамі (CIK), дэманструе выдатную прадукцыйнасць аналізатара Countstar Rigel у прамым параўнанні з праточнымі цытометрамі высокага класа.PBMCs мышэй у культуры былі афарбаваныя CD3-FITC, CD4-PE, CD8-PE і CD56-PE і індукаваны інтэрлейкіну (IL) 6. Затым аналізавалі адначасова з дапамогай Countstar® Rigel і праточнай цытаметрыі.У гэтым тэсце CD3-CD4, CD3-CD8 і CD3-CD56 былі падзеленыя на тры групы, каб вызначыць долю розных субпапуляцый клетак.

Выяўленне дэгенераваных клетак з дапамогай імунафлюарэсцэнцыі, моноклональные антыцелы, якія вырабляюць клеткавыя лініі, страцяць некаторыя станоўчыя клоны падчас праліферацыі і пасажу клетак з-за дэградацыі або генетычных мутацый.Больш высокія страты істотна паўплываюць на прадукцыйнасць вытворчага працэсу.Маніторынг дэградацыі гуляе важную ролю ў кіраванні працэсам, каб зрушыць выхад антыцелаў да аптымальнага.

Большасць антыцелаў, якія вырабляюцца ў прамысловасці BioPharma, можна выявіць з дапамогай імунафлюарэсцэнтнай маркіроўкі і колькасна аналізаваць з дапамогай серыі Countstar Rigel.Прыведзеныя ніжэй выявы яркага поля і канала флуоресценции выразна паказваюць тыя клоны, якія страцілі ўласцівасць выпрацоўваць патрэбныя антыцелы.Больш дэталёвы аналіз з дапамогай праграмнага забеспячэння DeNovo FCS Express Image пацвярджае, што 86,35% усіх клетак экспрэсуюць імунаглабуліны, толькі 3,34% відавочна адмоўныя.

Трыпан (вялікая літара B у сінім) Падлік клетак, афарбоўка трыпанавым сінім па-ранейшаму выкарыстоўваецца ў большасці лабараторый культуры клетак.

Дадатак Trypan Blue Viability and Cell Density BioApp можа быць усталяваны на ўсіх мадэлях Countstar Rigel.Нашы абароненыя алгарытмы распазнавання выяваў аналізуюць больш за 20 параметраў, каб класіфікаваць кожны выяўлены аб'ект.

КК для захоўвання сотавай лініі. У сховішчы ячэек складаная канцэпцыя кіравання якасцю забяспечвае бяспечны і эфектыўны маніторынг усіх сотавых прадуктаў.Гэта гарантуе стабільную якасць крыякансерваваных клетак, крыякансерваваных для эксперыментаў, распрацоўкі працэсаў і вытворчасці.

Countstar Rigel атрымлівае выявы з высокім дазволам, аналізуючы розныя марфалагічныя характарыстыкі клеткавых аб'ектаў, такія як дыяметр, форма і тэндэнцыя да агрэгацыі.Выявы розных этапаў працэсу можна лёгка параўнаць адзін з адным.Такім чынам, змены ў форме і агрэгацыі можна лёгка выявіць, пазбягаючы суб'ектыўных вымярэнняў чалавека.А база дадзеных Countstar Rigel мае складаную сістэму кіравання для захоўвання і пошуку малюнкаў і дадзеных.