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Pour la thérapie cellulaire CAR-T

  • 1.Collecte
  • 2. Isolement
  • 3.Modification
  • 4.Expansion
  • 5.Récolte
  • 6. CQ du produit
  • 7.Traitement

Ce que nous pouvons faire

  • Viabilité AO/PI
  • Cytotoxicité cellulaire
  • Efficacité de transfection
  • Apoptose cellulaire
  • Cycle cellulaire
  • Marqueur de CD
  • Cellules dégénérées
  • Comptage de cellules
  • Ligne cellulaire
AO/PI Viability
Viabilité AO/PI

La viabilité à double fluorescence (AO / PI), l'orange d'acridine (AO) et l'iodure de propidium (PI) sont des colorants de coloration nucléique nucléaire et de liaison aux acides.L'AO peut pénétrer la membrane des cellules mortes et vivantes et tacher le noyau, générant une fluorescence verte.En revanche, le PI ne peut pénétrer que les membranes en désintégration des cellules nucléées mortes, générant une fluorescence rouge.La technologie basée sur l'image du exclut les fragments cellulaires, les débris et les particules d'artefacts ainsi que les événements sous-dimensionnés tels que les plaquettes, ce qui donne un résultat très précis.En conclusion, le système peut être utilisé à chaque étape du processus de fabrication des cellules.

Cell Cytotoxicity
Cytotoxicité cellulaire

Cytotoxicité à médiation cellulaire T / NK, Dans la thérapie cellulaire CAR-T récemment approuvée par la FDA, les lymphocytes T génétiquement modifiés se lient spécifiquement aux cellules cancéreuses ciblées (T) et les tuent.Les analyseurs sont capables d'analyser ce processus complet de cytotoxicité à médiation cellulaire T/NK.

Des études de cytotoxicité sont réalisées en marquant les cellules cancéreuses cibles avec CFSE ou en les transfectant avec GFP.Hoechst 33342 peut être utilisé pour colorer toutes les cellules (cellules T et cellules tumorales).Alternativement, les cellules tumorales cibles peuvent être colorées avec CFSE.L'iodure de propidium (PI) est utilisé pour colorer les cellules mortes (cellules T et cellules tumorales).La discrimination entre différentes cellules peut être obtenue en utilisant cette stratégie de coloration.

Transfection Efficiency
Efficacité de transfection

Efficacité de la transfection GFP, En génétique moléculaire, dans divers organismes modèles et en biologie cellulaire, le gène GFP est fréquemment utilisé comme rapporteur pour les études d'expression.Actuellement, les scientifiques utilisent couramment des microscopes à fluorescence ou des cytomètres en flux pour analyser l'efficacité de la transfection des cellules de mammifères.Mais la gestion de la technologie complexe d'un cytomètre en flux avancé exige un opérateur expérimenté et hautement qualifié. permet aux utilisateurs d'effectuer facilement et avec précision un test d'efficacité de transfection sans les coûts d'exploitation et de maintenance associés à la cytométrie en flux traditionnelle.

Cell Apoptosis
Apoptose cellulaire

Apoptose cellulaire, la progression de l'apoptose cellulaire peut être surveillée à l'aide de l'annexine-V conjuguée au FITC en combinaison avec le 7-ADD.Les résidus de phosphatidylsérine (PS) sont normalement situés à l'intérieur de la membrane plasmique des cellules saines.Au début de l'apoptose, l'intégrité de la membrane est perdue et la PS sera transférée à l'extérieur de la membrane cellulaire.L'annexine V a une forte affinité avec la PS et est donc le marqueur idéal pour les cellules apoptotiques précoces.

Cell Cycle
Cycle cellulaire

Cycle cellulaire, Au cours de la division cellulaire, les cellules contiennent des quantités accrues d'ADN.Marqué par PI, une augmentation de l'intensité de fluorescence est directement proportionnelle à une accumulation d'ADN.Les différences dans les intensités de fluorescence des cellules individuelles sont les indicateurs de l'état réel du cycle cellulaire. Les cellules MCF 7 ont été traitées avec 4 μM de Nocodazole pour arrêter ces cellules à différents stades de leur cycle cellulaire.Les images en fond clair acquises au cours de ce scénario de test nous permettent d'identifier chaque cellule.Le canal de fluorescence PI du identifie les signaux ADN de cellules individuelles, même en agrégats.Une analyse détaillée des intensités de fluorescence peut être effectuée à l'aide du FCS.

CD Marker
Marqueur de CD

CD Marker Phenotyping, les modèles offrent une approche plus rapide, plus simple et plus sensible au phénotypage immunologique des cellules plus efficace.Avec des images haute résolution et de puissantes capacités d'analyse de données intégrées, le permet aux utilisateurs d'obtenir des résultats fiables et constants sans avoir besoin de paramètres de contrôle complexes et d'ajustements de compensation de fluorescence.

La différenciation des cellules tueuses induites par les cytokines (CIK) démontre la qualité de performance exceptionnelle de l'analyseur en comparaison directe avec les cytomètres en flux haut de gamme.Les PBMC de souris en culture ont été colorées avec CD3-FITC, CD4-PE, CD8-PE et CD56-PE, et induites par l'interleukine (IL) 6. Puis analysées simultanément avec Countstar® Rigel et cytométrie en flux.Dans ce test, le CD3-CD4, le CD3-CD8 et le CD3-CD56 ont été divisés en trois groupes, pour déterminer la proportion de différentes sous-populations cellulaires.

Degenerated Cells
Cellules dégénérées

Détection des cellules dégénérées par immunofluorescence, les anticorps monoclonaux produisant des lignées cellulaires perdront certains clones positifs lors de la prolifération et du passage des cellules en raison de la dégradation ou des mutations génétiques.Une perte plus élevée affectera considérablement la productivité du processus de fabrication.La surveillance de la dégradation joue un rôle important dans le contrôle du processus pour déplacer le rendement des anticorps vers l'optimum.

La plupart des anticorps fabriqués dans l'industrie BioPharma peuvent être détectés par marquage par immunofluorescence et analysés quantitativement par la série .Les images en fond clair et en fluorescence ci-dessous montrent clairement les clones qui ont perdu leur attribut pour produire les anticorps souhaités.L'analyse plus détaillée avec le logiciel DeNovo FCS Express Image confirme que 86,35 % de toutes les cellules expriment les immunoglobulines, seulement 3,34 % sont clairement négatives.

Cell Counting
Comptage de cellules

Trypan (capitaliser B en bleu) Comptage cellulaire, la coloration au bleu Trypan est encore utilisée dans la majorité des laboratoires de culture cellulaire.

Le Trypan Blue Viability and Cell Density BioApp peut être installé sur tous les modèles .Nos algorithmes de reconnaissance d'images protégées analysent plus de 20 paramètres pour classer chaque objet détecté.

Cell Line
Ligne cellulaire

Cell Line Storage QC, Dans le stockage des cellules, un concept sophistiqué de gestion de la qualité assure une surveillance sûre et efficace de tous les produits cellulaires.Cela garantit la qualité stable des cellules cryoconservées, cryoconservées pour les expériences, le développement de processus et la production.

Le acquiert des images haute résolution, analysant diverses caractéristiques morphologiques des objets cellulaires telles que le diamètre, la forme et la tendance à l'agrégation.Les images des différentes étapes du processus peuvent être facilement comparées les unes aux autres.Ainsi, les variations de forme et d'agrégation peuvent être facilement détectées, en évitant les mesures humaines subjectives.Et la base de données dispose d'un système de gestion sophistiqué pour le stockage et la récupération des images et des données.

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