Жизнеспособност с двойна флуоресценция (AO/PI), акридин портокал (AO) и пропидиев йодид (PI) са ядрено нуклеиново оцветяване и киселинно-свързващи багрила.АО може да проникне през мембраната както на мъртви, така и на живи клетки и да оцветява ядрото, генерирайки зелена флуоресценция.Обратно, PI може да проникне само в разпадащите се мембрани на мъртви клетки с ядра, генерирайки червена флуоресценция.Технологията на Countstar Rigel, базирана на изображения, изключва клетъчни фрагменти, отломки и артефактни частици, както и събития с малък размер като тромбоцити, давайки много точен резултат.В заключение, системата Countstar Rigel може да се използва за всяка стъпка от процеса на производство на клетки.

T/NK клетъчно-медиирана цитотоксичност, В наскоро одобрената от FDA CAR-T клетъчна терапия, генетично конструираните Т-лимфоцити се свързват специфично с целевите ракови клетки (T) и ги убиват.Анализаторите Countstar Rigel са в състояние да анализират този пълен процес на T/NK клетъчно-медиирана цитотоксичност.

Изследванията за цитотоксичност се извършват чрез маркиране на целевите ракови клетки с CFSE или трансфектирането им с GFP.Hoechst 33342 може да се използва за оцветяване на всички клетки (както Т-клетки, така и туморни клетки).Алтернативно, целевите туморни клетки могат да бъдат оцветени с CFSE.Пропидиев йодид (PI) се използва за оцветяване на мъртви клетки (както Т-клетки, така и туморни клетки).С помощта на тази стратегия за оцветяване може да се получи дискриминация между различните клетки.

Ефективност на GFP трансфекция, В молекулярната генетика, различни моделни организми и клетъчната биология, GFP генът често се използва като репортер за изследвания на експресията.Понастоящем учените обикновено използват флуоресцентни микроскопи или поточни цитометри, за да анализират ефективността на трансфекцията на клетки от бозайници.Но боравенето със сложната технология на усъвършенстван проточен цитометър изисква опитен и висококвалифициран оператор.Countstar Rigel позволява на потребителите лесно и точно да извършват анализ за ефективност на трансфекцията без разходи за експлоатация и поддръжка, свързани с традиционната поточна цитометрия.

Клетъчна апоптоза. Напредъкът на клетъчната апоптоза може да се наблюдава с помощта на FITC конюгиран Анексин-V в комбинация с 7-ADD.Остатъците от фосфатидилсерин (PS) обикновено се намират от вътрешната страна на плазмената мембрана на здравите клетки.По време на ранна апоптоза целостта на мембраната се губи и PS ще бъде преместен от външната страна на клетъчната мембрана.Анексин V има силен афинитет към PS и следователно е идеалният маркер за ранни апоптотични клетки.

Клетъчен цикъл, по време на клетъчното делене, клетките съдържат увеличени количества ДНК.Белязано с PI, увеличаването на интензитета на флуоресценция е право пропорционално на натрупването на ДНК.Разликите в интензитета на флуоресценция на единичните клетки са индикатори за действителното състояние на клетъчния цикъл. MCF 7 клетките бяха третирани с 4 μM нокодазол за спиране на тези клетки на различни етапи от клетъчния им цикъл.Изображенията на светло поле, получени по време на този тестов сценарий, ни позволяват да идентифицираме всяка отделна клетка.Флуоресцентният канал на PI на Countstar Rigel идентифицира ДНК сигналите на единични клетки дори в агрегати.Подробен анализ на интензитета на флуоресценция може да се извърши с помощта на FCS.

Фенотипиране на CD маркери, Моделите на Countstar Rigel предлагат по-бърз, по-опростен и по-чувствителен подход за по-ефективно имуно-базирано фенотипиране на клетките.С изображения с висока разделителна способност и мощни интегрирани възможности за анализ на данни, Countstar Rigel позволява на потребителите да постигат постоянно надеждни резултати без нужда от обширни сложни настройки за управление и корекции на компенсация на флуоресценцията.

Клетъчната диференциация, предизвикана от цитокини убиец (CIK), демонстрира изключителното качество на работа на анализатора Countstar Rigel в директно сравнение с проточни цитометри от висок клас.РВМС на мишка в култура се оцветяват с CD3-FITC, CD4-PE, CD8-PE и CD56-PE и се индуцират от интерлевкин (IL) 6. След това се анализират едновременно с Countstar® Rigel и поточна цитометрия.В този тест CD3-CD4, CD3-CD8 и CD3-CD56 бяха разделени на три групи, за да се определи съотношението на различните клетъчни субпопулации.

Откриване на дегенерирани клетки чрез имунофлуоресценция, моноклонални антитела, произвеждащи клетъчни линии, ще загубят някои положителни клонинги по време на клетъчната пролиферация и пасаж поради разграждане или генетични мутации.По-високата загуба значително ще повлияе на производителността на производствения процес.Мониторингът на разграждането играе важна роля в контрола на процеса за изместване на добива на антитела към оптимума.

Повечето от антителата, произведени в индустрията BioPharma, могат да бъдат открити чрез имунофлуоресцентно маркиране и анализирани количествено от серията Countstar Rigel.Изображенията на светло поле и флуоресцентен канал по-долу ясно показват онези клонинги, които са загубили атрибута си да произвеждат желаните антитела.По-подробният анализ със софтуера DeNovo FCS Express Image потвърждава, че 86,35% от всички клетки експресират имуноглобулините, само 3,34% са ясно отрицателни.

Трипан (с главни букви B в синьо) Преброяване на клетки, оцветяването с трипаново синьо все още се използва в повечето лаборатории за клетъчни култури.

Приложението Trypan Blue Viability и Cell Density BioApp може да бъде инсталирано на всички модели на Countstar Rigel.Нашите защитени алгоритми за разпознаване на изображения анализират повече от 20 параметъра, за да класифицират всеки един открит обект.

QC за съхранение на клетъчна линия, в клетъчното съхранение, усъвършенстваната концепция за управление на качеството гарантира безопасно, ефективно наблюдение на всички клетъчни продукти.Това гарантира стабилното качество на клетките, криоконсервирани, криоконсервирани за експерименти, разработване на процеси и производство.

Countstar Rigel придобива изображения с висока разделителна способност, анализирайки различни морфологични характеристики на клетъчните обекти, като диаметър, форма и тенденция към агрегиране.Изображенията на различни етапи на процеса могат лесно да се сравняват едно с друго.Така че вариациите във формата и агрегирането могат лесно да бъдат открити, като се избягват субективните човешки измервания.А базата данни Countstar Rigel има сложна система за управление за съхранение и извличане на изображения и данни.