Duálna fluorescenčná životaschopnosť (AO/PI), akridínová oranž (AO) a propídiumjodid (PI) sú farbivá na farbenie jadier a kyseliny viažuce.AO môže preniknúť cez membránu mŕtvych aj živých buniek a farbiť jadro, čím vytvára zelenú fluorescenciu.Na rozdiel od toho, PI môže prenikať iba cez dezintegračné membrány mŕtvych buniek s jadrami, čím generuje červenú fluorescenciu.Technológia Countstar Rigel založená na obraze vylučuje bunkové fragmenty, úlomky a častice artefaktov, ako aj udalosti poddimenzované, ako sú krvné doštičky, čo poskytuje vysoko presný výsledok.Na záver, systém Countstar Rigel možno použiť pre každý krok procesu výroby buniek.

Cytotoxicita sprostredkovaná T/NK bunkami, V nedávno schválenej FDA bunkovej terapii CAR-T sa geneticky upravené T-lymfocyty špecificky viažu na cieľové rakovinové bunky (T) a zabíjajú ich.Analyzátory Countstar Rigel sú schopné analyzovať tento kompletný proces cytotoxicity sprostredkovanej T/NK bunkami.

Štúdie cytotoxicity sa uskutočňujú označením cieľových rakovinových buniek pomocou CFSE alebo ich transfekciou pomocou GFP.Hoechst 33342 sa môže použiť na farbenie všetkých buniek (ako T buniek, tak aj nádorových buniek).Alternatívne môžu byť cieľové nádorové bunky zafarbené pomocou CFSE.Propidium jodid (PI) sa používa na farbenie mŕtvych buniek (ako T buniek, tak aj nádorových buniek).Pomocou tejto stratégie farbenia je možné dosiahnuť rozlíšenie medzi rôznymi bunkami.

Účinnosť transfekcie GFP, V molekulárnej genetike, rôznych modelových organizmoch a bunkovej biológii sa gén GFP často používa ako reportér pre štúdie expresie.V súčasnosti vedci bežne používajú fluorescenčné mikroskopy alebo prietokové cytometre na analýzu účinnosti transfekcie buniek cicavcov.Ale zvládnutie komplexnej technológie pokročilého prietokového cytometra si vyžaduje skúseného a vysokokvalifikovaného operátora.Countstar Rigel umožňuje používateľom jednoducho a presne vykonávať test účinnosti transfekcie bez nákladov na prevádzku a údržbu spojených s tradičnou prietokovou cytometriou.

Bunková apoptóza, Postup bunkovej apoptózy môže byť monitorovaný použitím FITC konjugovaného annexinu-V v kombinácii so 7-ADD.Zvyšky fosfatidylserínu (PS) sa normálne nachádzajú na vnútornej strane plazmatickej membrány zdravých buniek.Počas skorej apoptózy sa integrita membrány stratí a PS sa premiestni na vonkajšiu stranu bunkovej membrány.Annexin V má silnú afinitu k PS, a preto je ideálnym markerom pre skoré apoptotické bunky.

Bunkový cyklus, Počas delenia bunky obsahujú bunky zvýšené množstvo DNA.Označené PI, zvýšenie intenzity fluorescencie je priamo úmerné akumulácii DNA.Rozdiely v intenzitách fluorescencie jednotlivých buniek sú indikátormi skutočného stavu bunkového cyklu Bunky MCF 7 boli ošetrené 4 uM nokodazolu, aby sa tieto bunky zastavili v rôznych štádiách ich bunkového cyklu.Snímky v jasnom poli získané počas tohto testovacieho scenára nám umožňujú identifikovať každú jednotlivú bunku.PI fluorescenčný kanál Countstar Rigel identifikuje signály DNA jednotlivých buniek aj v agregátoch.Podrobnú analýzu intenzít fluorescencie je možné vykonať pomocou FCS.

Fenotypizácia CD markerov, modely Countstar Rigel ponúkajú rýchlejší, jednoduchší a citlivejší prístup k efektívnejšiemu fenotypovaniu buniek na báze imunity.S obrázkami s vysokým rozlíšením a výkonnými schopnosťami integrovanej analýzy údajov umožňuje Countstar Rigel používateľom dosahovať trvalo spoľahlivé výsledky bez potreby rozsiahlych zložitých nastavení riadenia a úprav kompenzácie fluorescencie.

Diferenciácia buniek vyvolaných cytokínmi (CIK) demonštruje vynikajúcu kvalitu výkonu analyzátora Countstar Rigel v priamom porovnaní s prietokovými cytometrami vysokej triedy.PBMC myší v kultúre boli zafarbené CD3-FITC, CD4-PE, CD8-PE a CD56-PE a indukované interleukínom (IL) 6. Potom sa analyzovali súčasne s Countstar® Rigel a prietokovou cytometriou.V tomto teste boli CD3-CD4, CD3-CD8 a CD3-CD56 rozdelené do troch skupín, aby sa určil podiel rôznych bunkových subpopulácií.

Detekcia degenerovaných buniek imunofluorescenciou, monoklonálne protilátky produkujúce bunkové línie stratia niektoré pozitívne klony počas bunkovej proliferácie a pasážovania v dôsledku degradácie alebo genetických mutácií.Vyššia strata výrazne ovplyvní produktivitu výrobného procesu.Monitorovanie degradácie hrá dôležitú úlohu pri riadení procesu, aby sa posunul výťažok protilátok na optimum.

Väčšina protilátok vyrábaných v priemysle BioPharma môže byť detekovaná imunofluorescenčným značením a kvantitatívne analyzovaná sériou Countstar Rigel.Snímky svetlého poľa a fluorescenčných kanálov nižšie jasne ukazujú tie klony, ktoré stratili svoju vlastnosť produkovať požadované protilátky.Podrobnejšia analýza pomocou softvéru DeNovo FCS Express Image potvrdzuje, že 86,35 % všetkých buniek exprimuje imunoglobulíny, iba 3,34 % je jednoznačne negatívnych.

Trypán (veľké písmeno B modrou) Počítanie buniek, farbenie trypánovou modrou sa stále používa vo väčšine laboratórií bunkových kultúr.

Aplikácia Trypan Blue Viability and Cell Density BioApp sa dá nainštalovať na všetky modely Countstar Rigel.Naše algoritmy na rozpoznávanie chránených obrázkov analyzujú viac ako 20 parametrov na klasifikáciu každého jedného zisteného objektu.

Cell Line Storage QC, Sofistikovaný koncept riadenia kvality v oblasti bunkového skladovania zaisťuje bezpečné a efektívne monitorovanie všetkých bunkových produktov.To zaručuje stabilnú kvalitu kryokonzervovaných buniek, kryokonzervovaných pre experimenty, vývoj procesov a výrobu.

Countstar Rigel získava obrázky s vysokým rozlíšením a analyzuje rôzne morfologické charakteristiky bunkových objektov, ako je priemer, tvar a tendencia k agregácii.Obrázky rôznych krokov procesu sa dajú ľahko navzájom porovnávať.Takže variácie v tvare a agregácii možno ľahko zistiť, ak sa vyhnete subjektívnym ľudským meraniam.A databáza Countstar Rigel má sofistikovaný systém správy na ukladanie a vyhľadávanie obrázkov a údajov.