Mājas » CAR-T šūnu terapijai

CAR-T šūnu terapijai

  • 1.Kolekcija
  • 2.Izolācija
  • 3.Modifikācija
  • 4.Paplašināšana
  • 5.Ražas novākšana
  • 6. Produkta kvalitātes kontrole
  • 7.Ārstēšana

Ko mēs varam darīt

  • AO/PI dzīvotspēja
  • Šūnu citotoksicitāte
  • Transfekcijas efektivitāte
  • Šūnu apoptoze
  • Šūnu cikls
  • CD marķieris
  • Deģenerētas šūnas
  • Šūnu skaitīšana
  • Šūnu līnija
AO/PI Viability
AO/PI dzīvotspēja

Divkāršās fluorescences dzīvotspēja (AO/PI), akridīna oranžs (AO) un propīdija jodīds (PI) ir kodolu nukleīnu krāsojošas un skābi saistošas ​​krāsvielas.AO var iekļūt gan mirušo, gan dzīvo šūnu membrānā un notraipīt kodolu, radot zaļu fluorescenci.Turpretī PI var tikai caurstrāvot mirušo kodolu šūnu sadalīšanās membrānas, radot sarkanu fluorescenci.Countstar Rigel uz attēlu balstītā tehnoloģija izslēdz šūnu fragmentus, gružus un artefaktu daļiņas, kā arī maza izmēra notikumus, piemēram, trombocītus, nodrošinot ļoti precīzu rezultātu.Visbeidzot, Countstar Rigel sistēmu var izmantot katrā šūnu ražošanas procesa posmā.

Cell Cytotoxicity
Šūnu citotoksicitāte

T/NK šūnu izraisīta citotoksicitāte. Nesen FDA apstiprinātajā CAR-T šūnu terapijā ģenētiski modificētie T-limfocīti īpaši saistās ar mērķa vēža šūnām (T) un tās nogalina.Countstar Rigel analizatori spēj analizēt šo pilno T/NK šūnu izraisītās citotoksicitātes procesu.

Citotoksicitātes pētījumus veic, marķējot mērķa vēža šūnas ar CFSE vai transfekējot tās ar GFP.Hoechst 33342 var izmantot, lai iekrāsotu visas šūnas (gan T šūnas, gan audzēja šūnas).Alternatīvi mērķa audzēja šūnas var iekrāsot ar CFSE.Propīdija jodīdu (PI) izmanto, lai iekrāsotu atmirušās šūnas (gan T šūnas, gan audzēja šūnas).Izmantojot šo krāsošanas stratēģiju, var iegūt dažādu šūnu diskrimināciju.

Transfection Efficiency
Transfekcijas efektivitāte

GFP transfekcijas efektivitāte, molekulārajā ģenētikā, dažādos modeļu organismos un šūnu bioloģijā GFP gēnu bieži izmanto kā reportieri ekspresijas pētījumos.Pašlaik zinātnieki parasti izmanto fluorescējošus mikroskopus vai plūsmas citometrus, lai analizētu zīdītāju šūnu transfekcijas efektivitāti.Taču, lai apstrādātu progresīva plūsmas citometra sarežģīto tehnoloģiju, ir nepieciešams pieredzējis un augsti kvalificēts operators.Countstar Rigel ļauj lietotājiem viegli un precīzi veikt transfekcijas efektivitātes testu bez darbības un uzturēšanas izmaksām, kas saistītas ar tradicionālo plūsmas citometriju.

Cell Apoptosis
Šūnu apoptoze

Šūnu apoptoze, šūnu apoptozes progresu var kontrolēt, izmantojot FITC konjugētu aneksīnu-V kombinācijā ar 7-ADD.Fosfatidilserīna (PS) atlikumi parasti atrodas veselu šūnu plazmas membrānas iekšējā pusē.Agrīnās apoptozes laikā membrānas integritāte tiek zaudēta, un PS tiks pārvietots uz šūnas membrānas ārpusi.Anneksīnam V ir spēcīga afinitāte pret PS, un tāpēc tas ir ideāls marķieris agrīnām apoptotiskām šūnām.

Cell Cycle
Šūnu cikls

Šūnu cikls, Šūnu dalīšanās laikā šūnas satur palielinātu DNS daudzumu.Apzīmēts ar PI, fluorescences intensitātes pieaugums ir tieši proporcionāls DNS uzkrāšanai.Atsevišķu šūnu fluorescences intensitātes atšķirības ir šūnu cikla faktiskā statusa indikatori. MCF 7 šūnas tika apstrādātas ar 4 μM Nocodazole, lai aizturētu šīs šūnas dažādos to šūnu cikla posmos.Spilgtā lauka attēli, kas iegūti šī testa scenārija laikā, ļauj mums identificēt katru atsevišķu šūnu.Countstar Rigel PI fluorescences kanāls identificē atsevišķu šūnu DNS signālus pat agregātos.Detalizētu fluorescences intensitātes analīzi var veikt, izmantojot FCS.

CD Marker
CD marķieris

CD marķiera fenotipēšana, Countstar Rigel modeļi piedāvā ātrāku, vienkāršāku un jutīgāku pieeju, efektīvākai šūnu fenotipēšanai, kuras pamatā ir imūnsistēma.Ar augstas izšķirtspējas attēliem un jaudīgām integrētām datu analīzes iespējām Countstar Rigel ļauj lietotājiem sasniegt nemainīgi uzticamus rezultātus bez nepieciešamības veikt plašus sarežģītus vadības iestatījumus un fluorescences kompensācijas pielāgojumus.

Citokīnu izraisītā slepkava (CIK) šūnu diferenciācija demonstrē izcilu Countstar Rigel analizatora veiktspējas kvalitāti, salīdzinot ar augstas klases plūsmas citometriem.Peļu PBMC kultūrā tika iekrāsoti ar CD3-FITC, CD4-PE, CD8-PE un CD56-PE un inducēti ar interleikīnu (IL) 6. Pēc tam tika analizēti vienlaicīgi ar Countstar® Rigel un plūsmas citometriju.Šajā testā CD3-CD4, CD3-CD8 un CD3-CD56 tika sadalīti trīs grupās, lai noteiktu dažādu šūnu apakšpopulāciju proporciju.

Degenerated Cells
Deģenerētas šūnas

Deģenerētu šūnu noteikšana ar imunofluorescenci, monoklonālās antivielas, kas ražo šūnu līnijas, šūnu proliferācijas un pārejas laikā zaudēs dažus pozitīvos klonus degradācijas vai ģenētisku mutāciju dēļ.Lielāki zaudējumi būtiski ietekmēs ražošanas procesa produktivitāti.Noārdīšanās uzraudzībai ir svarīga loma procesa kontrolē, lai novirzītu antivielu daudzumu uz optimālo.

Lielāko daļu BioPharma rūpniecībā ražoto antivielu var noteikt ar imunofluorescences marķējumu un kvantitatīvi analizēt ar Countstar Rigel sēriju.Tālāk redzamie spilgtā lauka un fluorescences kanālu attēli skaidri parāda tos klonus, kuri zaudēja savu atribūtu, lai ražotu vēlamās antivielas.Detalizētāka analīze ar programmatūru DeNovo FCS Express Image apstiprina, ka 86,35% no visām šūnām ekspresē imūnglobulīnus, tikai 3,34% ir skaidri negatīvi.

Cell Counting
Šūnu skaitīšana

Tripāna (lielais burts B zilā krāsā) Šūnu skaitīšana, Tripāna zilā krāsošana joprojām tiek izmantota lielākajā daļā šūnu kultūras laboratoriju.

Trypan Blue Viability un Cell Density BioApp var instalēt visos Countstar Rigel modeļos.Mūsu aizsargātie attēlu atpazīšanas algoritmi analizē vairāk nekā 20 parametrus, lai klasificētu katru atklāto objektu.

Cell Line
Šūnu līnija

Cell Line Storage QC, šūnu krātuvē sarežģīta kvalitātes vadības koncepcija nodrošina drošu un efektīvu visu šūnu produktu uzraudzību.Tas garantē stabilu šūnu kriokonservētu, kriokonservētu šūnu kvalitāti eksperimentiem, procesa izstrādei un ražošanai.

Countstar Rigel iegūst augstas izšķirtspējas attēlus, analizējot dažādas šūnu objektu morfoloģiskās īpašības, piemēram, diametru, formu un agregācijas tendenci.Dažādu procesa posmu attēlus var viegli salīdzināt savā starpā.Tādējādi formas un agregācijas atšķirības var viegli noteikt, izvairoties no subjektīviem cilvēka mērījumiem.Un Countstar Rigel datu bāzei ir sarežģīta pārvaldības sistēma attēlu un datu glabāšanai un izguvei.

Ieteicamie produkti

Saistītie resursi

Jūsu privātums mums ir svarīgs.

Mēs izmantojam sīkfailus, lai uzlabotu jūsu pieredzi, apmeklējot mūsu tīmekļa vietnes: veiktspējas sīkfaili parāda, kā jūs izmantojat šo vietni, funkcionālās sīkdatnes atceras jūsu preferences un mērķauditorijas atlases sīkfaili palīdz mums kopīgot saturu, kas attiecas uz jums.

Pieņemt

Pieslēgties