Biologiset ja AAV-pohjaiset geeniterapiat kasvattavat markkinaosuuttaan sairauksien hoidossa.Vankan ja tehokkaan nisäkässolulinjan kehittäminen niiden tuotantoa varten on kuitenkin haastavaa ja vaatii yleensä laajaa solujen karakterisointia.Historiallisesti näissä solupohjaisissa määrityksissä on käytetty virtaussytometriä.Virtaussytometri on kuitenkin suhteellisen kallis ja vaatii laajaa koulutusta sekä käyttöä että huoltoa varten.Viime aikoina laskentaominaisuuksien ja korkealaatuisten kameraanturien lisääntyessä kuvapohjaista sytometriaa on kehitetty tarjoamaan tarkka ja kustannustehokas vaihtoehto solulinjaprosessien kehittämiseen.Tässä työssä kuvailimme solulinjan kehittämistyönkulkua, joka sisältää kuvapohjaisen sytometrin, nimittäin Countstar Rigelin, transfektion tehokkuuden arvioimiseksi ja stabiilin poolin arvioimiseksi käyttämällä CHO- ja HEK293-soluja, jotka ilmentävät vasta-ainetta ja vastaavasti rAAV-vektoria.Kahdessa tapaustutkimuksessa osoitimme:
- Countstar Rigel tarjosi samanlaisen tunnistustarkkuuden kuin virtaussytometria.
- Countstar Rigel -pohjainen poolin arviointi voi auttaa määrittämään halutun ryhmän yksisolukloonausta (SCC) varten.
- Countstar Rigelin sisältämä solulinjan kehitysalusta saavutti 2,5 g/l mAb-tiitterin.
Keskustelimme myös mahdollisuudesta käyttää Countstaria toisena kerroksena rAAV DoE-pohjaisessa optimointikohteessa.
Jos haluat lisätietoja, lataa PDF-tiedosto.
