អរូបី៖ កោសិកាដើម Mesenchymal គឺជាបណ្តុំនៃកោសិកាដើម pluripotent ដែលអាចត្រូវបានញែកចេញពី mesoderm ។ជាមួយនឹងការបន្តចម្លងដោយខ្លួនឯង និងលក្ខណៈខុសគ្នាច្រើនទិស ពួកគេមានសក្តានុពលខ្ពស់សម្រាប់ការព្យាបាលផ្សេងៗក្នុងវេជ្ជសាស្ត្រ។កោសិកាដើម Mesenchymal មាន phenotype ភាពស៊ាំពិសេស និងសមត្ថភាពគ្រប់គ្រងភាពស៊ាំ។ដូច្នេះ កោសិកាដើម mesenchymal ត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយក្នុងការប្តូរកោសិកាដើម វិស្វកម្មជាលិកា និងការប្តូរសរីរាង្គ។ហើយលើសពីកម្មវិធីទាំងនេះ ពួកវាត្រូវបានគេប្រើជាឧបករណ៍ដ៏ល្អមួយនៅក្នុងវិស្វកម្មជាលិកាជាកោសិកាគ្រាប់ពូជនៅក្នុងស៊េរីនៃការពិសោធន៍ស្រាវជ្រាវជាមូលដ្ឋាន និងគ្លីនិក។រហូតមកដល់ពេលនេះ មិនទាន់មានវិធីសាស្រ្ត និងស្តង់ដារដែលទទួលយកយ៉ាងទូលំទូលាយសម្រាប់ការត្រួតពិនិត្យគុណភាពនៃកោសិកាដើម mesenchymal នោះទេ។Countstar Rigel អាចតាមដានការប្រមូលផ្តុំ លទ្ធភាពជោគជ័យ និងលក្ខណៈ phenotype (និងការផ្លាស់ប្តូររបស់វា) កំឡុងពេលផលិត និងភាពខុសគ្នានៃកោសិកាដើមទាំងនេះ។Countstar Rigel ក៏មានអត្ថប្រយោជន៍ក្នុងការទទួលបានព័ត៌មាន morphological បន្ថែម ដែលផ្តល់ដោយការថតរូបភាពដែលមានមូលដ្ឋានលើពន្លឺភ្លឺ និង fluorescence ក្នុងអំឡុងពេលដំណើរការទាំងមូលនៃការត្រួតពិនិត្យគុណភាពកោសិកា។Countstar Rigel ផ្តល់នូវវិធីសាស្រ្តលឿន ទំនើប និងអាចទុកចិត្តបានសម្រាប់ការត្រួតពិនិត្យគុណភាពនៃកោសិកាដើម។
សំភារៈនិងវិធីសាស្រ្ត:
កោសិកាដើម mesenchymal ដែលទទួលបានដោយ Adipose (AdMSCs) ត្រូវបានផ្តល់អំណោយដោយសាស្រ្តាចារ្យ Nianmin Qi ដំណោះស្រាយស្នាមប្រឡាក់ AO/PI (Shanghai RuiYu, CF002)។អង់ទីករ៖ CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, HLADR (BD Company)។
AdMSCs ត្រូវបានចិញ្ចឹមក្នុងកន្លែងភ្ញាស់សំណើម 37 ℃ 5% CO2 ។រំលាយជាមួយ trypsin មុនពេលប្រើ។
នីតិវិធីស្នាមប្រឡាក់ស៊ីឌីត្រូវបានអនុវត្តតាមសៀវភៅណែនាំអំពីអង្គបដិប្រាណ។
ការរកឃើញសញ្ញាសម្គាល់ស៊ីឌីជាមួយ Countstar Rigel៖
1. ដំណើរការកម្មវិធីពណ៌សញ្ញាត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយកំណត់ឆានែល PE ទៅជារូបភាព PE fluorescence ។
2. វាលចំនួន 3 ត្រូវបានចាប់យកពីបន្ទប់នីមួយៗ។
3. បន្ទាប់ពីរូបភាព និងការវិភាគដំបូងត្រូវបានបញ្ចប់ ការកំណត់ (ច្រកទ្វារចូល) សម្រាប់ការផ្ទេរវិជ្ជមាន និងអវិជ្ជមានត្រូវបានកំណត់ដោយកម្មវិធី FCS ។
ការត្រួតពិនិត្យគុណភាពនៃកោសិកាដើម
រូបភាពខាងក្រោម (រូបភាពទី 1) បង្ហាញពីដំណើរការនៃ ការព្យាបាលដោយកោសិកាដើម .
រូបភាពទី 1: នីតិវិធីសម្រាប់ការព្យាបាលដោយកោសិកាដើម
លទ្ធផល៖
កំណត់ការប្រមូលផ្តុំ លទ្ធភាពជោគជ័យ អង្កត់ផ្ចិត និងការប្រមូលផ្តុំនៃ AdMSCs ។
លទ្ធភាពជោគជ័យនៃ AdMSCs ត្រូវបានកំណត់ដោយ AO/PI នីតិវិធីនៃកម្មវិធីពណ៌ពីរត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយការកំណត់ឆានែលបៃតង និងឆានែលក្រហមទៅជារូបភាព AO និង PI fluorescence បូករួមទាំងវាលភ្លឺ។រូបភាពឧទាហរណ៍ត្រូវបានបង្ហាញក្នុងរូបភាពទី 2 ។
រូបភាពទី 2. រូបភាពមុនពេលដឹកជញ្ជូន និងក្រោយពេលដឹកជញ្ជូន AdMSCs ។A. មុនពេលដឹកជញ្ជូន;រូបភាពតំណាងត្រូវបានបង្ហាញ។ខ - បន្ទាប់ពីការដឹកជញ្ជូន;រូបភាពតំណាងត្រូវបានបង្ហាញ។
លទ្ធភាពជោគជ័យរបស់ AdMSCs ត្រូវបានផ្លាស់ប្តូរយ៉ាងខ្លាំងបន្ទាប់ពីការដឹកជញ្ជូន បើប្រៀបធៀបទៅនឹងមុនពេលដឹកជញ្ជូន។លទ្ធភាពជោគជ័យមុនការដឹកជញ្ជូនគឺ 92% ប៉ុន្តែវាបានកាត់បន្ថយមកត្រឹម 71% បន្ទាប់ពីការដឹកជញ្ជូន។លទ្ធផលត្រូវបានបង្ហាញក្នុងរូបភាពទី 3 ។
រូបភាពទី 3. លទ្ធផលដែលអាចសម្រេចបាននៃ AdMSCs (មុនពេលដឹកជញ្ជូន និងក្រោយពេលដឹកជញ្ជូន)
អង្កត់ផ្ចិត និងការប្រមូលផ្តុំក៏ត្រូវបានកំណត់ដោយ Countstar Rigel ផងដែរ។អង្កត់ផ្ចិតនៃ AdMSCs ត្រូវបានផ្លាស់ប្តូរយ៉ាងខ្លាំងបន្ទាប់ពីការដឹកជញ្ជូនបើប្រៀបធៀបទៅនឹងមុនពេលដឹកជញ្ជូន។អង្កត់ផ្ចិតមុនពេលដឹកជញ្ជូនគឺ 19µm ប៉ុន្តែវាបានកើនឡើងដល់ 21µm បន្ទាប់ពីការដឹកជញ្ជូន។ការប្រមូលផ្តុំមុនពេលដឹកជញ្ជូនគឺ 20% ប៉ុន្តែវាបានកើនឡើងដល់ 25% បន្ទាប់ពីការដឹកជញ្ជូន។ពីរូបភាពដែលបានថតដោយ Countstar Rigel, phenotype នៃ AdMSCs ត្រូវបានផ្លាស់ប្តូរយ៉ាងខ្លាំងបន្ទាប់ពីការដឹកជញ្ជូន។លទ្ធផលត្រូវបានបង្ហាញក្នុងរូបភាពទី 4 ។
រូបភាពទី 4: អង្កត់ផ្ចិតនិងលទ្ធផលសរុប។A: រូបភាពតំណាងរបស់ AdMSCs, phenotype នៃ AdMSCs ត្រូវបានផ្លាស់ប្តូរយ៉ាងខ្លាំងបន្ទាប់ពីការដឹកជញ្ជូន។ខ: ការប្រមូលផ្តុំមុនពេលដឹកជញ្ជូនគឺ 20% ប៉ុន្តែវាបានកើនឡើងដល់ 25% បន្ទាប់ពីការដឹកជញ្ជូន។C: អង្កត់ផ្ចិតមុនពេលដឹកជញ្ជូនគឺ 19µm ប៉ុន្តែវាបានកើនឡើងដល់ 21µm បន្ទាប់ពីការដឹកជញ្ជូន។
កំណត់ immunophenotype នៃ AdMSCs ដោយ Countstar Rigel
immunophenotype នៃ AdMSCs ត្រូវបានកំណត់ដោយ Countstar Rigel, AdMSCs ត្រូវបាន incubated ជាមួយ antibody ផ្សេងគ្នារៀងគ្នា (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, HLA-DR) ។នីតិវិធីនៃកម្មវិធីពណ៌សញ្ញាត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយកំណត់ឆានែលបៃតងទៅជារូបភាព PE fluorescence បូកនឹងវាលភ្លឺ។ផ្នែកយោងរូបភាពវាលភ្លឺត្រូវបានអនុវត្តជារបាំងដើម្បីយកគំរូសញ្ញា PE fluorescence ។លទ្ធផលនៃ CD105 ត្រូវបានបង្ហាញ (រូបភាពទី 5) ។
រូបភាពទី 5: លទ្ធផល CD105 នៃ AdMSCs ត្រូវបានកំណត់ដោយ Countstar Rigel ។ចម្លើយ៖ ការវិភាគបរិមាណនៃភាគរយវិជ្ជមាននៃ CD105 នៅក្នុងគំរូផ្សេងៗគ្នាដោយកម្មវិធី FCS Express 5 plus ។ខ៖ រូបភាពដែលមានគុណភាពខ្ពស់ផ្តល់ព័ត៌មានអំពីរូបវិទ្យាបន្ថែម។C៖ លទ្ធផលដែលមានសុពលភាពដោយរូបភាពតូចៗនៃកោសិកានីមួយៗ ឧបករណ៍កម្មវិធី FCS បានបែងចែកកោសិកាទៅជាក្រុមផ្សេងៗគ្នា យោងទៅតាមការបញ្ចេញមតិប្រូតេអ៊ីនខុសៗគ្នារបស់ពួកគេ។
លទ្ធផលអង្គបដិប្រាណផ្សេងទៀតត្រូវបានបង្ហាញនៅក្នុងរូបភាពទី 6
រូបភាពទី 6: ក៖ រូបភាពតំណាងនៃ ASCs ដែលមានរូបសណ្ឋានរាងដូច spindle ។ថតដោយមីក្រូទស្សន៍ OLYMPUS ។ការពង្រីកដើម, (10x) ។ខ: ភាពខុសគ្នានៃ Adipogenic នៃ ASCs ត្រូវបានបង្ហាញដោយស្នាមប្រឡាក់ក្រហម Ruthenium ដែលបង្ហាញពីតំបន់នៃការជីកយករ៉ែ។ថតដោយមីក្រូទស្សន៍ OLYMPUS ។ការពង្រីកដើម (10x) ។C: លក្ខណៈ Countstar FL នៃ ASCs ។
សង្ខេប៖
Countstar FL អាចតាមដានការប្រមូលផ្តុំ លទ្ធភាពជោគជ័យ និងលក្ខណៈ phenotype (និងការផ្លាស់ប្តូររបស់វា) កំឡុងពេលផលិត និងភាពខុសគ្នានៃកោសិកាដើមទាំងនេះ។FCS Express ផ្គត់ផ្គង់មុខងារដើម្បីពិនិត្យមើលរាល់ក្រឡាសញ្ញា ធ្វើឱ្យទិន្នន័យមានសុពលភាពតាមរយៈរូបភាព។អ្នកប្រើប្រាស់ក៏អាចមានទំនុកចិត្តក្នុងការអនុវត្តការពិសោធន៍បន្ទាប់ដោយផ្អែកលើលទ្ធផល Countstar Rigel ។Countstar Rigel ផ្តល់នូវវិធីសាស្រ្តលឿន ទំនើប និងអាចទុកចិត្តបានសម្រាប់ការត្រួតពិនិត្យគុណភាពនៃកោសិកាដើម។
