Geàrr-chunntas: Tha bun-cheallan mesenchymal nam fo-sheata de cheallan-gas ioma-chumhachdach a dh’ fhaodar a sgaradh bhon mesoderm.Leis na feartan ath-nuadhachaidh fèin-riochdachadh agus eadar-dhealachadh ioma-stiùiridh aca, tha comas àrd aca airson diofar leigheasan ann an leigheas.Tha phenotype dìon sònraichte agus comas riaghlaidh dìon aig bun-cheallan mesenchymal.Mar sin, tha bun-cheallan mesenchymal mar-thà air an cleachdadh gu farsaing ann an tar-chuir bun-cheallan, innleadaireachd clò, agus tar-chuir organan.Agus A bharrachd air na tagraidhean sin, tha iad air an cleachdadh mar inneal air leth freagarrach ann an innleadaireachd clò mar cheallan sìol ann an sreath de dheuchainnean rannsachaidh bunaiteach agus clionaigeach.Gu ruige seo, chan eil dòigh agus inbhe air gabhail ris gu farsaing airson smachd càileachd bun-cheallan mesenchymal.Faodaidh an Countstar Rigel sùil a chumail air dùmhlachd, ion-obrachadh, agus feartan phenotype (agus na h-atharrachaidhean aca) rè cinneasachadh agus eadar-dhealachadh nan bun-cheallan sin.Tha buannachd aig an Countstar Rigel cuideachd ann a bhith a’ faighinn fiosrachadh morphologach a bharrachd, air a sholarachadh leis na clàraidhean ìomhaigh maireannach stèidhichte air raon soilleir agus fluorescence rè a’ phròiseas iomlan de sgrùdadh càileachd cealla.Tha an Countstar Rigel a’ tabhann dòigh luath, adhartach agus earbsach airson smachd càileachd bun-cheallan.
Stuthan agus dòighean-obrach:
Chaidh bun-cheallan mesenchymal a thàinig bho adipose (AdMSCn) a thoirt seachad leis an Ollamh Nianmin Qi, fuasgladh staining AO/PI (Shanghai RuiYu, CF002).Antibody: CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, HLADR (BD Company).
Bha AdMSCn air an àiteachadh ann an goireadair tais 37 ℃, 5% CO2.Dèan geàrr-chunntas le trypsin mus tèid a chleachdadh.
Chaidh modh staining comharra CD a leantainn mar leabhar-làimhe antibody.
Lorg comharran CD le Countstar Rigel:
1. Chaidh modh tagraidh dath comharra a chruthachadh le bhith a 'suidheachadh an t-sianail PE gu ìomhaigh PE fluorescence.
2. Chaidh 3 raointean a ghlacadh bho gach seòmar.
3. Às deidh ìomhaighean agus mion-sgrùdadh tùsail a chrìochnachadh, chaidh suidheachadh stairsneach (geata log) airson tar-chuir adhartach is àicheil a shuidheachadh le bathar-bog FCS.
Smachd càileachd air gas cealla
Tha an dealbh a leanas (Figear 1) a’ sealltainn modh-obrach leigheas gas-chealla .
Figear 1: An dòigh-obrach airson leigheas bun-cheallan
Toraidhean:
A’ dearbhadh dùmhlachd, ion-obrachadh, trast-thomhas, agus cruinneachadh AdMSCn.
Chaidh comasachd AdMSCn a dhearbhadh le AO / PI, Chaidh modh tagraidh dà-dath a chruthachadh le bhith a’ suidheachadh sianal Uaine agus sianal Dearg gu ìomhaigh AO agus fluorescence PI, a bharrachd air raon soilleir.Tha eisimpleirean de dhealbhan air an sealltainn ann am Figear 2.
Figear 2. Ìomhaighean de AdMSCn ro-làimh agus às deidh còmhdhail.A. Roimh ghiùlain ;tha ìomhaigh riochdachail air a thaisbeanadh.B. An dèidh còmhdhail;tha ìomhaigh riochdachail air a thaisbeanadh.
Chaidh comasachd AdMSCn atharrachadh gu mòr às deidh còmhdhail an taca ri còmhdhail ro-làimh.Bha an comas obrachaidh ro ghiùlain 92%, ach chaidh e sìos gu 71% às deidh còmhdhail.Tha an toradh air a shealltainn ann am Figear 3.
Figear 3. Toraidhean ion-obrachaidh AdMSCs (Ro còmhdhail agus às dèidh còmhdhail)
Chaidh an trast-thomhas agus an cruinneachadh cuideachd a dhearbhadh le Countstar Rigel.Chaidh trast-thomhas nan AdMSCn atharrachadh gu mòr às deidh còmhdhail an taca ri còmhdhail ro-làimh.B' e 19µm an trast-thomhas ron ghiùlain, ach chaidh e suas gu 21µm an dèidh còmhdhail.B’ e 20% an cruinneachadh de ro-chòmhdhail, ach chaidh e suas gu 25% às deidh còmhdhail.Bho na h-ìomhaighean a ghlac Countstar Rigel, chaidh an phenotype de AdMSCn atharrachadh gu mòr às deidh còmhdhail.Tha na toraidhean air an sealltainn ann am Figear 4.
Figear 4: An trast-thomhas agus na toraidhean cruinneachaidh.F: Chaidh na h-ìomhaighean riochdachail de AdMSCn, an phenotype de AdMSCn atharrachadh gu mòr às deidh còmhdhail.B: B’ e 20% an t-iomlanachadh ro ghiùlain, ach chaidh e suas gu 25% às deidh còmhdhail.C: B' e 19µm an trast-thomhas ron ghiùlain, ach dh'àrdaich e gu 21µm an dèidh còmhdhail.
Obraich a-mach an immunophenotype de AdMSCs le Countstar Rigel
Chaidh an immunophenotype de AdMSCn a dhearbhadh le Countstar Rigel, chaidh AdMSCn a bhrosnachadh le diofar antibody fa leth (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, HLA-DR).Chaidh modh tagraidh dath-chomharran a chruthachadh le bhith a’ suidheachadh seanail Uaine gu ìomhaigh PE fluorescence, a bharrachd air raon soilleir.Chaidh sgaradh iomraidh dealbh achaidh soilleir a chuir an sàs mar masg gus an comharra fluorescence PE a shampall.Chaidh toraidhean CD105 a shealltainn (Figear 5).
Figear 5: Chaidh toraidhean CD105 de AdMSCn a dhearbhadh le Countstar Rigel.A: Mion-sgrùdadh cainneachdail air an àireamh sa cheud adhartach de CD105 ann an diofar shampaill le bathar-bog FCS express 5 plus.B: Bidh ìomhaighean àrd-inbhe a’ toirt seachad fiosrachadh morphologach a bharrachd.C: Toraidhean dearbhte le òrdagan de gach cealla, roinn innealan bathar-bog FCS na ceallan ann am buidhnean eadar-dhealaichte a rèir an abairt pròtain eadar-dhealaichte.
Chaidh toraidhean antibodies eile a shealltainn ann am Fig 6
Figear 6: A: Ìomhaigh riochdachail de ASCn le morf-eòlas àbhaisteach ann an cumadh dealgan.Air a ghlacadh le miocroscop OLYMPUS.Meudachadh tùsail, (10x).B: Tha eadar-dhealachadh adipogenic de ASCn ri fhaicinn le staining Ruthenium Red a’ sealltainn raointean mèinnearachd.Air a ghlacadh le miocroscop OLYMPUS.Meudachadh tùsail (10x).C: Comharrachadh Countstar FL de ASCn.
Geàrr-chunntas:
Faodaidh an Countstar FL sùil a chumail air dùmhlachd, comasachd, agus feartan phenotype (agus na h-atharrachaidhean aca) rè cinneasachadh agus eadar-dhealachadh nan bun-cheallan sin.Bidh FCS express a’ toirt seachad an gnìomh ath-sgrùdadh a dhèanamh air a h-uile cealla chomharran, an dàta a dhearbhadh tron ìomhaigh.Faodaidh misneachd a bhith aig an neach-cleachdaidh cuideachd na h-ath dheuchainnean a dhèanamh stèidhichte air toraidhean Countstar Rigel.Tha an Countstar Rigel a’ tabhann dòigh luath, adhartach agus earbsach airson smachd càileachd bun-cheallan.
