Fa'amatalaga: Mesenchymal stem cell o se vaega o le pluripotent stem cell e mafai ona vavae ese mai le mesoderm.Faatasi ai ma a latou faʻafouga faʻafouga a le tagata lava ia ma uiga faʻaeseesega faʻasolosolo, latou te maua se gafatia maualuga mo togafitiga eseese i vailaʻau.Mesenchymal stem cell ei ai le tulaga tulaga ese o le puipuia o le tino ma le malosi o tulafono faatonutonu.O le mea lea, o sela o le mesenchymal ua uma ona faʻaaogaina i le totoina o sela, inisinia o mea, ma le totoina o okeni.Ma I tua atu o nei talosaga, o loʻo faʻaaogaina e avea o se mea faigaluega lelei i le inisinia o mea e fai ma sela fatu i se faasologa o suʻesuʻega faʻavae ma suʻesuʻega faʻapitoa.E o'o mai i le taimi nei, e le'o i ai se auala e talia lautele ma tulaga fa'ata'atia mo le fa'atonutonuina lelei o sela o le mesenchymal stem.E mafai e le Countstar Rigel ona mataʻituina le faʻaogaina, faʻaogaina, ma uiga faʻapitoa (ma o latou suiga) i le taimi o le gaosiga ma le eseesega o nei sela.O le Countstar Rigel o loʻo i ai foi le avanoa i le mauaina o faʻamatalaga morphological faʻaopoopo, e tuʻuina atu e le susulu tumau ma faʻamaufaʻailoga ata faʻapipiʻi i le faagasologa atoa o le mataʻituina lelei o sela.O le Countstar Rigel o loʻo ofoina atu se auala vave, faʻapitoa, ma faʻatuatuaina mo le faʻatonutonuina lelei o sela fatu.
Mea ma metotia:
O sela o le mesenchymal e maua mai i le Adipose (AdMSCs) na fa'ameaalofaina e le Polofesa Nianmin Qi, le fofo staining AO / PI (Shanghai RuiYu, CF002).Antibody: CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, HLADR (Kamupani BD).
AdMSCs sa fa'atupuina ile 37 ℃, 5% CO2 fa'amama fa'asusu.Eli fa'atasi ma le trypsin a'o le'i fa'aogaina.
O le fa'ailogaina o le CD sa mulimulita'ia e pei o le tusi lesona o le antibody.
Su'e fa'ailoga CD ma Countstar Rigel:
1. Na faia se faiga fa'ailoga-lanu e ala i le fa'atulagaina o le auala PE i ata PE fluorescence.
2. 3 fanua na faoa mai potu taitasi.
3. Ina ua maeʻa faʻataʻitaʻiga ma suʻesuʻega muamua, o le faʻamaufaʻailoga (faitotoa ogalaau) faʻatulagaina mo suiga lelei ma le le lelei na faʻatulagaina e le FCS software.
Puleaina lelei o le sela fatu
O le Ata o lo'o mulimuli mai (Ata 1) o lo'o fa'aalia ai le fa'agasologa o togafitiga o sela fatu .
Ata 1: O le fa'agasologa mo togafitiga o sela fa'ato'a
I'uga:
Fuafuaina o le faʻatonuga, faʻaogaina, lautele, ma le tuʻufaʻatasia o AdMSCs.
O le faʻaogaina o AdMSCs na faʻamoemoeina e le AO / PI, O se faiga faʻaoga lua-lanu na faia e ala i le setiina o le alalaupapa Green ma le Red channel i le ata AO ma le PI fluorescence, faʻatasi ai ma se fanua susulu.Fa'ata'ita'iga ata na fa'aalia ile Ata 2.
Ata 2. Ata a'o le'i aveina ma ina ua mae'a felauaiga o AdMSCs.A. A'o le'i felauaiga;o lo'o fa'aalia se ata fa'atusa.B. A uma felauaiga;o lo'o fa'aalia se ata fa'atusa.
O le fa'aogaina o le AdMSC na matua'i suia ina ua mae'a felauaiga pe a fa'atusatusa i luma o felauaiga.O le gafatia a'o le'i aveina e 92%, ae na fa'aitiitia i le 71% ina ua mae'a felauaiga.O le taunuuga na faʻaalia i le Ata 3.
Ata 3. O taunu'uga fa'aola ole AdMSCs (A'o le'i felauaiga ma pe a mae'a felauaiga)
O le lautele ma le tuufaatasiga na fuafuaina foi e Countstar Rigel.O le lautele o le AdMSCs na suia tele ina ua maeʻa felauaiga pe a faʻatusatusa i luma o felauaiga.O le lautele a'o le'i aveina e 19µm, ae na fa'atupula'ia i le 21µm ina ua mae'a felauaiga.O le tu'ufa'atasiga o mea a'o le'i fa'asalalauina e 20%, ae na fa'atupula'ia i le 25% ina ua mae'a felauaiga.Mai ata na pu'eina e Countstar Rigel, o le phenotype o AdMSCs na suia tele ina ua mae'a felauaiga.O fa'ai'uga na fa'aalia i le Ata 4.
Ata 4: O le lautele ma le tu'ufa'atasiga taunu'uga.A: O ata fa'atusa o le AdMSCs, o le fa'aaliga o le AdMSC na matua'i suia ina ua mae'a felauaiga.B: O le fa'aputuga a'o le'i felauaiga e 20%, ae na fa'atupula'ia i le 25% ina ua mae'a felauaiga.C: O le lautele a'o le'i aveina le 19µm, ae na fa'atupula'ia i le 21µm ina ua mae'a felauaiga.
Su'e le immunophenotype o AdMSCs e Countstar Rigel
O le immunophenotype o AdMSCs na fuafuaina e Countstar Rigel, AdMSCs na faʻapipiʻiina ma faʻamaʻi eseese (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, HLA-DR).O se faiga fa'ailoga lanu na faia e ala i le fa'atulagaina o se alalaupapa Green e fa'atusa ai le PE fluorescence, fa'atasi ai ma se fanua susulu.Na fa'aogaina le vaeluaga o fa'amatalaga fa'amatalaga o le fanua e fai ma ufimata e fa'ata'ita'i ai le fa'ailoga fa'alili PE.O faʻaiʻuga o le CD105 na faʻaalia (Ata 5).
Ata 5: CD105 taunuuga o AdMSCs na fuafuaina e Countstar Rigel.A: Su'esu'ega fa'atatau o le pasene lelei o le CD105 i fa'ata'ita'iga 'ese'ese e le FCS express 5 fa'aopoopo le polokalame.B: O ata sili ona lelei e maua ai fa'amatalaga fa'aopoopo.C: Fa'amaonia fa'ai'uga e la'ititi o sela ta'itasi ta'itasi, o meafaigaluega faakomepiuta FCS na vaevaeina sela i vaega 'ese'ese e tusa ai ma a latou fa'aaliga polotini eseese.
O isi faʻaiʻuga o antibodies na faʻaalia i le Ata 6
Ata 6: A: O se ata fa'atusa o ASC fa'atasi ai ma fa'ata'ita'iga fa'apitoa e pei o le spindle.Pu'eina e le OLYMPUS microscope.Fa'aliga muamua, (10x).B: Adipogenic differentiation o ASCs o loʻo faʻamaonia e le Ruthenium Red staining faʻaalia vaega o mineralization.Pu'eina e le OLYMPUS microscope.Fa'aliga muamua (10x).C: Countstar FL uiga o ASCs.
Aotelega:
E mafai e le Countstar FL ona mataʻituina le faʻaogaina, faʻaogaina, ma uiga faʻapitoa (ma o latou suiga) i le taimi o le gaosiga ma le eseesega o nei sela.O le FCS express e tuʻuina atu le galuega e toe iloilo ai faʻailoga uma, faʻamaonia faʻamaumauga e ala i le ata.E mafai foʻi e le tagata faʻaoga ona maua le talitonuga e faʻatino isi faʻataʻitaʻiga e faʻavae i luga o taunuuga Countstar Rigel.O le Countstar Rigel o loʻo ofoina atu se auala vave, faʻapitoa, ma faʻatuatuaina mo le faʻatonutonuina lelei o sela fatu.
