ਇੱਕ ਨੋਵਲ ਇਮੇਜਿੰਗ ਸਾਇਟੋਮੇਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਸਟੈਮ ਸੈੱਲ ਦੀ ਸਿੱਧੀ ਇਕਾਗਰਤਾ, ਵਿਹਾਰਕਤਾ ਅਤੇ ਫੀਨੋਟਾਈਪ ਮਾਪ

ਸਾਰ: ਮੇਸੇਨਚਾਈਮਲ ਸਟੈਮ ਸੈੱਲ ਪਲੂਰੀਪੋਟੈਂਟ ਸਟੈਮ ਸੈੱਲਾਂ ਦਾ ਸਬਸੈੱਟ ਹਨ ਜੋ ਮੇਸੋਡਰਮ ਤੋਂ ਅਲੱਗ ਕੀਤੇ ਜਾ ਸਕਦੇ ਹਨ।ਉਹਨਾਂ ਦੇ ਸਵੈ-ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਤੀ ਨਵੀਨੀਕਰਨ ਅਤੇ ਬਹੁ-ਦਿਸ਼ਾ ਵਿਭਿੰਨਤਾ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਦੇ ਨਾਲ, ਉਹਨਾਂ ਕੋਲ ਦਵਾਈ ਵਿੱਚ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਥੈਰੇਪੀਆਂ ਦੀ ਉੱਚ ਸੰਭਾਵਨਾ ਹੈ।Mesenchymal ਸਟੈਮ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਵਿਲੱਖਣ ਇਮਿਊਨ ਫੀਨੋਟਾਈਪ ਅਤੇ ਇਮਿਊਨ ਰੈਗੂਲੇਸ਼ਨ ਸਮਰੱਥਾ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।ਇਸ ਲਈ, ਮੇਸੇਨਚਾਈਮਲ ਸਟੈਮ ਸੈੱਲ ਪਹਿਲਾਂ ਹੀ ਸਟੈਮ ਸੈੱਲ ਟ੍ਰਾਂਸਪਲਾਂਟੇਸ਼ਨ, ਟਿਸ਼ੂ ਇੰਜੀਨੀਅਰਿੰਗ, ਅਤੇ ਅੰਗ ਟ੍ਰਾਂਸਪਲਾਂਟੇਸ਼ਨ ਵਿੱਚ ਵਿਆਪਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।ਅਤੇ ਇਹਨਾਂ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨਾਂ ਤੋਂ ਪਰੇ, ਇਹਨਾਂ ਨੂੰ ਟਿਸ਼ੂ ਇੰਜੀਨੀਅਰਿੰਗ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਆਦਰਸ਼ ਸਾਧਨ ਵਜੋਂ ਬੁਨਿਆਦੀ ਅਤੇ ਕਲੀਨਿਕਲ ਖੋਜ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਦੀ ਇੱਕ ਲੜੀ ਵਿੱਚ ਸੀਡਰ ਸੈੱਲਾਂ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਹੁਣ ਤੱਕ, ਮੇਸੇਨਚਾਈਮਲ ਸਟੈਮ ਸੈੱਲਾਂ ਦੇ ਗੁਣਵੱਤਾ ਨਿਯੰਤਰਣ ਲਈ ਵਿਆਪਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪ੍ਰਵਾਨਿਤ ਢੰਗ ਅਤੇ ਮਿਆਰ ਨਹੀਂ ਹੈ।ਕਾਊਂਟਸਟਾਰ ਰਿਗੇਲ ਇਹਨਾਂ ਸਟੈਮ ਸੈੱਲਾਂ ਦੇ ਉਤਪਾਦਨ ਅਤੇ ਵਿਭਿੰਨਤਾ ਦੇ ਦੌਰਾਨ ਇਕਾਗਰਤਾ, ਵਿਹਾਰਕਤਾ, ਅਤੇ ਫੀਨੋਟਾਈਪ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ (ਅਤੇ ਉਹਨਾਂ ਦੀਆਂ ਤਬਦੀਲੀਆਂ) ਦੀ ਨਿਗਰਾਨੀ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਕਾਊਂਟਸਟਾਰ ਰਿਗੇਲ ਕੋਲ ਸੈੱਲ ਗੁਣਵੱਤਾ ਨਿਗਰਾਨੀ ਦੀ ਪੂਰੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦੌਰਾਨ ਸਥਾਈ ਬ੍ਰਾਈਟਫੀਲਡ ਅਤੇ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ-ਅਧਾਰਿਤ ਚਿੱਤਰ ਰਿਕਾਰਡਿੰਗਾਂ ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤੀ ਗਈ ਵਾਧੂ ਰੂਪ ਵਿਗਿਆਨਕ ਜਾਣਕਾਰੀ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਵੀ ਫਾਇਦਾ ਹੈ।ਕਾਊਂਟਸਟਾਰ ਰਿਗੇਲ ਸਟੈਮ ਸੈੱਲਾਂ ਦੀ ਗੁਣਵੱਤਾ ਨਿਯੰਤਰਣ ਲਈ ਇੱਕ ਤੇਜ਼, ਆਧੁਨਿਕ ਅਤੇ ਭਰੋਸੇਮੰਦ ਢੰਗ ਪੇਸ਼ ਕਰਦਾ ਹੈ।

ਸਮੱਗਰੀ ਅਤੇ ਢੰਗ:
ਪ੍ਰੋਫ਼ੈਸਰ ਨਿਆਨਮਿਨ ਕਿਊ, ਏਓ/ਪੀਆਈ ਸਟੈਨਿੰਗ ਸਲੂਸ਼ਨ (ਸ਼ੰਘਾਈ ਰੁਈਯੂ, ਸੀਐਫ002) ਦੁਆਰਾ ਐਡੀਪੋਜ਼-ਪ੍ਰਾਪਤ ਮੇਸੇਨਚਾਈਮਲ ਸਟੈਮ ਸੈੱਲ (AdMSCs) ਗਿਫਟ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ।ਐਂਟੀਬਾਡੀ: CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, HLADR (BD ਕੰਪਨੀ)।
AdMSCs ਨੂੰ ਇੱਕ 37℃, 5% CO2 ਨਮੀ ਵਾਲੇ ਇਨਕਿਊਬੇਟਰ ਵਿੱਚ ਸੰਸ਼ੋਧਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਵਰਤੋਂ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਟ੍ਰਿਪਸਿਨ ਨਾਲ ਪਾਚੋ.
ਸੀਡੀ ਮਾਰਕਰ ਸਟੈਨਿੰਗ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਨੂੰ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਦੇ ਮੈਨੂਅਲ ਵਜੋਂ ਅਪਣਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ।
ਕਾਊਂਟਸਟਾਰ ਰਿਗੇਲ ਨਾਲ ਸੀਡੀ ਮਾਰਕਰ ਖੋਜ:
1. PE ਚੈਨਲ ਨੂੰ ਚਿੱਤਰ PE ਫਲੋਰਸੈਂਸ 'ਤੇ ਸੈੱਟ ਕਰਕੇ ਇੱਕ ਸਿਗਨਲ-ਰੰਗ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ ਵਿਧੀ ਬਣਾਈ ਗਈ ਸੀ।
2. ਹਰੇਕ ਚੈਂਬਰ ਵਿੱਚੋਂ 3 ਖੇਤਾਂ ਨੂੰ ਕਬਜ਼ੇ ਵਿੱਚ ਲਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।
3. ਇਮੇਜਿੰਗ ਅਤੇ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਪੂਰਾ ਹੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਅਤੇ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਟ੍ਰਾਂਸਫੈਕਸ਼ਨ ਲਈ ਥ੍ਰੈਸ਼ਹੋਲਡ (ਲੌਗ ਗੇਟ) ਸੈਟਿੰਗ FCS ਸੌਫਟਵੇਅਰ ਦੁਆਰਾ ਸੈੱਟ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।

ਸਟੈਮ ਸੈੱਲ ਦੀ ਗੁਣਵੱਤਾ ਨਿਯੰਤਰਣ
ਹੇਠ ਦਿੱਤੀ ਚਿੱਤਰ (ਚਿੱਤਰ 1) ਦੀ ਵਿਧੀ ਦਰਸਾਉਂਦੀ ਹੈ ਸਟੈਮ ਸੈੱਲ ਥੈਰੇਪੀ .

ਚਿੱਤਰ 1: ਸਟੈਮ ਸੈੱਲ ਥੈਰੇਪੀ ਲਈ ਵਿਧੀ

ਨਤੀਜੇ:
AdMSCs ਦੀ ਇਕਾਗਰਤਾ, ਵਿਹਾਰਕਤਾ, ਵਿਆਸ, ਅਤੇ ਇਕੱਤਰਤਾ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣਾ।
AdMSCs ਦੀ ਵਿਵਹਾਰਕਤਾ AO/PI ਦੁਆਰਾ ਨਿਰਧਾਰਿਤ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ, ਇੱਕ ਦੋਹਰੇ ਰੰਗ ਦੀ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਨੂੰ AO ਅਤੇ PI ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਚਿੱਤਰ ਲਈ ਗ੍ਰੀਨ ਚੈਨਲ ਅਤੇ ਲਾਲ ਚੈਨਲ ਨੂੰ ਸੈੱਟ ਕਰਕੇ ਬਣਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ, ਨਾਲ ਹੀ ਇੱਕ ਚਮਕਦਾਰ ਖੇਤਰ।ਉਦਾਹਰਨ ਚਿੱਤਰ ਚਿੱਤਰ 2 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਏ ਗਏ ਸਨ।

ਚਿੱਤਰ 2. AdMSCs ਦੀ ਆਵਾਜਾਈ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਅਤੇ ਆਵਾਜਾਈ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਦੀਆਂ ਤਸਵੀਰਾਂ।A. ਆਵਾਜਾਈ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ;ਇੱਕ ਪ੍ਰਤੀਨਿਧ ਚਿੱਤਰ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ।B. ਆਵਾਜਾਈ ਤੋਂ ਬਾਅਦ;ਇੱਕ ਪ੍ਰਤੀਨਿਧ ਚਿੱਤਰ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ।

ਟਰਾਂਸਪੋਰਟ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਵਿੱਚ ਟਰਾਂਸਪੋਰਟੇਸ਼ਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ AdMSCs ਦੀ ਵਿਵਹਾਰਕਤਾ ਬਹੁਤ ਬਦਲ ਗਈ ਸੀ।ਆਵਾਜਾਈ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਵਿਹਾਰਕਤਾ 92% ਸੀ, ਪਰ ਆਵਾਜਾਈ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਇਹ ਘਟ ਕੇ 71% ਹੋ ਗਈ।ਨਤੀਜਾ ਚਿੱਤਰ 3 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ।

ਚਿੱਤਰ 3. AdMSCs ਦੇ ਵਿਹਾਰਕਤਾ ਨਤੀਜੇ (ਆਵਾਜਾਈ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਅਤੇ ਆਵਾਜਾਈ ਤੋਂ ਬਾਅਦ)

ਵਿਆਸ ਅਤੇ ਏਕੀਕਰਣ ਵੀ ਕਾਉਂਟਸਟਾਰ ਰਿਗੇਲ ਦੁਆਰਾ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਟਰਾਂਸਪੋਰਟ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਵਿੱਚ ਆਵਾਜਾਈ ਤੋਂ ਬਾਅਦ AdMSCs ਦਾ ਵਿਆਸ ਬਹੁਤ ਬਦਲ ਗਿਆ ਸੀ।ਆਵਾਜਾਈ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਵਿਆਸ 19µm ਸੀ, ਪਰ ਆਵਾਜਾਈ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਇਹ ਵਧ ਕੇ 21µm ਹੋ ਗਿਆ।ਆਵਾਜਾਈ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਦਾ ਸੰਗ੍ਰਹਿ 20% ਸੀ, ਪਰ ਆਵਾਜਾਈ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਇਹ ਵਧ ਕੇ 25% ਹੋ ਗਿਆ।ਕਾਉਂਟਸਟਾਰ ਰਿਗੇਲ ਦੁਆਰਾ ਕੈਪਚਰ ਕੀਤੇ ਗਏ ਚਿੱਤਰਾਂ ਤੋਂ, ਆਵਾਜਾਈ ਦੇ ਬਾਅਦ ਐਡਐਮਐਸਸੀ ਦੀ ਫੀਨੋਟਾਈਪ ਬਹੁਤ ਬਦਲ ਗਈ ਸੀ।ਨਤੀਜੇ ਚਿੱਤਰ 4 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਏ ਗਏ ਸਨ।

ਚਿੱਤਰ 4: ਵਿਆਸ ਅਤੇ ਏਕੀਕਰਣ ਨਤੀਜੇ।A: AdMSCs ਦੇ ਪ੍ਰਤੀਨਿਧ ਚਿੱਤਰ, AdMSCs ਦੀ ਫੀਨੋਟਾਈਪ ਆਵਾਜਾਈ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਬਹੁਤ ਬਦਲ ਗਈ ਸੀ।B: ਆਵਾਜਾਈ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਇਕੱਤਰਤਾ 20% ਸੀ, ਪਰ ਆਵਾਜਾਈ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਇਹ ਵਧ ਕੇ 25% ਹੋ ਗਈ।C: ਆਵਾਜਾਈ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਵਿਆਸ 19µm ਸੀ, ਪਰ ਆਵਾਜਾਈ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਇਹ ਵਧ ਕੇ 21µm ਹੋ ਗਿਆ।

Countstar Rigel ਦੁਆਰਾ AdMSCs ਦੀ ਇਮਯੂਨੋਫੇਨੋਟਾਈਪ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਓ
AdMSCs ਦੀ ਇਮਯੂਨੋਫੇਨੋਟਾਈਪ ਕਾਊਂਟਸਟਾਰ ਰਿਗੇਲ ਦੁਆਰਾ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ, AdMSCs ਨੂੰ ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, HLA-DR) ਨਾਲ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਇੱਕ ਸਿਗਨਲ-ਕਲਰ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਨੂੰ ਚਿੱਤਰ PE ਫਲੋਰਸੈਂਸ, ਅਤੇ ਇੱਕ ਚਮਕਦਾਰ ਖੇਤਰ ਲਈ ਇੱਕ ਗ੍ਰੀਨ ਚੈਨਲ ਸੈਟ ਕਰਕੇ ਬਣਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ।PE ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਸਿਗਨਲ ਦਾ ਨਮੂਨਾ ਲੈਣ ਲਈ ਬ੍ਰਾਈਟ ਫੀਲਡ ਪਿਕਚਰ ਰੈਫਰੈਂਸ ਸੈਗਮੈਂਟੇਸ਼ਨ ਨੂੰ ਮਾਸਕ ਵਜੋਂ ਲਾਗੂ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।CD105 ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਦਿਖਾਏ ਗਏ ਸਨ (ਚਿੱਤਰ 5).

ਚਿੱਤਰ 5: AdMSCs ਦੇ CD105 ਨਤੀਜੇ ਕਾਊਂਟਸਟਾਰ ਰਿਗੇਲ ਦੁਆਰਾ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ।A: FCS ਐਕਸਪ੍ਰੈਸ 5 ਪਲੱਸ ਸੌਫਟਵੇਅਰ ਦੁਆਰਾ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਨਮੂਨਿਆਂ ਵਿੱਚ CD105 ਦੀ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਪ੍ਰਤੀਸ਼ਤਤਾ ਦਾ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ।B: ਉੱਚ-ਗੁਣਵੱਤਾ ਵਾਲੀਆਂ ਤਸਵੀਰਾਂ ਵਾਧੂ ਰੂਪ ਵਿਗਿਆਨਿਕ ਜਾਣਕਾਰੀ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਦੀਆਂ ਹਨ।C: ਹਰੇਕ ਸੈੱਲ ਦੇ ਥੰਬਨੇਲ ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰਮਾਣਿਤ ਨਤੀਜੇ, FCS ਸੌਫਟਵੇਅਰ ਟੂਲਸ ਨੇ ਸੈੱਲਾਂ ਨੂੰ ਉਹਨਾਂ ਦੇ ਵੱਖੋ-ਵੱਖਰੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਸਮੀਕਰਨ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਸਮੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਵੰਡਿਆ।

ਹੋਰ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਚਿੱਤਰ 6 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਏ ਗਏ ਸਨ

ਚਿੱਤਰ 6: A: ਖਾਸ ਸਪਿੰਡਲ-ਆਕਾਰ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿਗਿਆਨ ਦੇ ਨਾਲ ASCs ਦਾ ਪ੍ਰਤੀਨਿਧ ਚਿੱਤਰ।OLYMPUS ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪ ਦੁਆਰਾ ਕੈਪਚਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ।ਮੂਲ ਵਿਸਤਾਰ, (10x)।B: ASCs ਦਾ ਐਡੀਪੋਜਨਿਕ ਵਿਭਿੰਨਤਾ ਖਣਿਜੀਕਰਨ ਦੇ ਖੇਤਰਾਂ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਣ ਵਾਲੇ ਰੁਥੇਨੀਅਮ ਰੈੱਡ ਸਟੈਨਿੰਗ ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰਮਾਣਿਤ ਹੈ।OLYMPUS ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪ ਦੁਆਰਾ ਕੈਪਚਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ।ਮੂਲ ਵਿਸਤਾਰ (10x)।C: ASCs ਦਾ ਕਾਊਂਟਸਟਾਰ FL ਗੁਣ।

ਸੰਖੇਪ:
ਕਾਊਂਟਸਟਾਰ FL ਇਹਨਾਂ ਸਟੈਮ ਸੈੱਲਾਂ ਦੇ ਉਤਪਾਦਨ ਅਤੇ ਵਿਭਿੰਨਤਾ ਦੇ ਦੌਰਾਨ ਇਕਾਗਰਤਾ, ਵਿਹਾਰਕਤਾ, ਅਤੇ ਫੀਨੋਟਾਈਪ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ (ਅਤੇ ਉਹਨਾਂ ਦੀਆਂ ਤਬਦੀਲੀਆਂ) ਦੀ ਨਿਗਰਾਨੀ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।FCS ਐਕਸਪ੍ਰੈਸ ਹਰ ਸਿਗਨਲ ਸੈੱਲ ਦੀ ਸਮੀਖਿਆ ਕਰਨ, ਚਿੱਤਰ ਦੁਆਰਾ ਡੇਟਾ ਨੂੰ ਪ੍ਰਮਾਣਿਤ ਕਰਨ ਲਈ ਫੰਕਸ਼ਨ ਦੀ ਸਪਲਾਈ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਉਪਭੋਗਤਾ ਨੂੰ ਕਾਊਂਟਸਟਾਰ ਰਿਗੇਲ ਦੇ ਨਤੀਜਿਆਂ ਦੇ ਆਧਾਰ 'ਤੇ ਅਗਲੇ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਨੂੰ ਪੂਰਾ ਕਰਨ ਦਾ ਭਰੋਸਾ ਵੀ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਕਾਊਂਟਸਟਾਰ ਰਿਗੇਲ ਸਟੈਮ ਸੈੱਲਾਂ ਦੀ ਗੁਣਵੱਤਾ ਨਿਯੰਤਰਣ ਲਈ ਇੱਕ ਤੇਜ਼, ਆਧੁਨਿਕ ਅਤੇ ਭਰੋਸੇਮੰਦ ਢੰਗ ਪੇਸ਼ ਕਰਦਾ ਹੈ।