Броење со двојно флуоресцес AOPI е тип на анализа што се користи за откривање на клеточната концентрација и одржливост.Растворот е комбинација од акридин портокал (боја зелено-флуоресцентна нуклеинска киселина) и пропидиум јодид (црвено-флуоресцентна нуклеинска киселина дамка).Пропидиум јодид (PI) е боја за исклучување на мембраната која навлегува само во клетките со компромитирани мембрани, додека акридин портокалот може да навлезе во сите клетки во популацијата.Кога двете бои се присутни во јадрото, пропидиум јодид предизвикува намалување на флуоресценцијата на акридин портокаловата флуоресценција со пренос на енергија со флуоресцентна резонанца (FRET).Како резултат на тоа, нуклеарните клетки со недопрени мембрани обојуваат флуоресцентно зелено и се бројат како живи, додека нуклеарните клетки со компромитирани мембрани обојуваат само флуоресцентно црвено и се бројат како мртви кога се користи системот Countstar® FL.Материјалот без јадра како што се црвените крвни зрнца, тромбоцитите и остатоците не флуоресираат и се игнорираат од софтверот Countstar® FL.
Процес на терапија со матични клетки
Слика 4 Следење на одржливост и клеточен број на мезенхимални матични клетки (MSCs) за употреба во клеточни терапии.
Одредете ја одржливоста на MSC со анализа на AO/PI и Trypan Blue
Слика 2. A. Слика на MSC обоена со AO/PI и Trypan Blue;2. Споредба на резултатот AO/PI и Trypan blue пред и по транспортот.
Индексот на рефракција на клетките се менува, боењето со трипан сино не беше толку очигледно, тешко е да се одреди одржливоста по транспортот.Додека флуоресценцијата со двојна боја овозможува боење на живи и мртви јадрени клетки, генерирањето точни резултати на одржливост дури и во присуство на остатоци, тромбоцити и црвени крвни зрнца.
