ਏਓਪੀਆਈ ਡੁਅਲ-ਫਲੋਰੋਸੇਸ ਕਾਉਂਟਿੰਗ ਸੈੱਲ ਦੀ ਇਕਾਗਰਤਾ ਅਤੇ ਵਿਹਾਰਕਤਾ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਲਈ ਵਰਤੀ ਜਾਂਦੀ ਪਰਖ ਦੀ ਕਿਸਮ ਹੈ।ਹੱਲ ਐਕ੍ਰਿਡਾਈਨ ਸੰਤਰੀ (ਹਰੇ-ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਨਿਊਕਲੀਇਕ ਐਸਿਡ ਦਾਗ) ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਪੀਡੀਅਮ ਆਇਓਡਾਈਡ (ਲਾਲ-ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਦਾਗ) ਦਾ ਸੁਮੇਲ ਹੈ।ਪ੍ਰੋਪੀਡੀਅਮ ਆਇਓਡਾਈਡ (PI) ਇੱਕ ਝਿੱਲੀ ਦੀ ਬੇਦਖਲੀ ਰੰਗਤ ਹੈ ਜੋ ਸਿਰਫ ਕਮਜ਼ੋਰ ਝਿੱਲੀ ਵਾਲੇ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਦਾਖਲ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਐਕਰੀਡਾਈਨ ਸੰਤਰੀ ਆਬਾਦੀ ਵਿੱਚ ਸਾਰੇ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਵੇਸ਼ ਕਰਨ ਦੇ ਯੋਗ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।ਜਦੋਂ ਦੋਵੇਂ ਰੰਗ ਨਿਊਕਲੀਅਸ ਵਿੱਚ ਮੌਜੂਦ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਤਾਂ ਪ੍ਰੋਪੀਡੀਅਮ ਆਇਓਡਾਈਡ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਰੈਜ਼ੋਨੈਂਸ ਐਨਰਜੀ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ (FRET) ਦੁਆਰਾ ਐਕਰੀਡਾਈਨ ਔਰੇਂਜ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਵਿੱਚ ਕਮੀ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣਦਾ ਹੈ।ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ, ਬਰਕਰਾਰ ਝਿੱਲੀ ਵਾਲੇ ਨਿਊਕਲੀਏਟਿਡ ਸੈੱਲ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਹਰੇ ਰੰਗ ਦੇ ਦਾਗ ਬਣਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਲਾਈਵ ਵਜੋਂ ਗਿਣੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਸਮਝੌਤਾ ਕੀਤੀ ਝਿੱਲੀ ਵਾਲੇ ਨਿਊਕਲੀਏਟਿਡ ਸੈੱਲ ਸਿਰਫ਼ ਫਲੋਰੋਸੈੰਟ ਲਾਲ ਰੰਗ ਦੇ ਹੁੰਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਕਾਊਂਟਸਟਾਰ® FL ਸਿਸਟਮ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਸਮੇਂ ਮਰੇ ਹੋਏ ਗਿਣੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।ਗੈਰ-ਨਿਊਕਲੀਏਟਿਡ ਸਮੱਗਰੀ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਲਾਲ ਰਕਤਾਣੂਆਂ, ਪਲੇਟਲੈਟਸ ਅਤੇ ਮਲਬੇ ਫਲੋਰਸ ਨਹੀਂ ਹੁੰਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਕਾਉਂਟਸਟਾਰ® FL ਸੌਫਟਵੇਅਰ ਦੁਆਰਾ ਅਣਡਿੱਠ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।
ਸਟੈਮ ਸੈੱਲ ਥੈਰੇਪੀ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ
ਚਿੱਤਰ 4 ਸੈੱਲ ਥੈਰੇਪੀਆਂ ਵਿੱਚ ਵਰਤੋਂ ਲਈ ਮੇਸੇਨਚਾਈਮਲ ਸਟੈਮ ਸੈੱਲ (MSCs) ਦੀ ਵਿਹਾਰਕਤਾ ਅਤੇ ਸੈੱਲ ਗਿਣਤੀ ਦੀ ਨਿਗਰਾਨੀ।
AO/PI ਅਤੇ Trypan ਬਲੂ ਪਰਖ ਦੁਆਰਾ MSC ਵਿਵਹਾਰਕਤਾ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਓ
ਚਿੱਤਰ 2. A. AO/PI ਅਤੇ Trypan ਬਲੂ ਦੁਆਰਾ ਦਾਗਿਆ MSC ਦਾ ਚਿੱਤਰ;2. ਟਰਾਂਸਪੋਰਟ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਅਤੇ ਬਾਅਦ ਵਿੱਚ AO/PI ਅਤੇ Trypan ਨੀਲੇ ਨਤੀਜੇ ਦੀ ਤੁਲਨਾ।
ਸੈੱਲ ਰਿਫ੍ਰੈਕਟਿਵ ਇੰਡੈਕਸ ਬਦਲਦਾ ਹੈ, ਟ੍ਰਾਈਪੈਨ ਬਲੂ ਸਟੈਨਿੰਗ ਇੰਨੀ ਸਪੱਸ਼ਟ ਨਹੀਂ ਸੀ, ਟ੍ਰਾਂਸਪੋਰਟ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਵਿਵਹਾਰਕਤਾ ਨੂੰ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨਾ ਮੁਸ਼ਕਲ ਹੈ.ਜਦੋਂ ਕਿ ਦੋਹਰਾ-ਰੰਗ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਲਾਈਵ ਅਤੇ ਮਰੇ ਹੋਏ ਨਿਊਕਲੀਏਟਿਡ ਸੈੱਲਾਂ ਦੇ ਧੱਬੇ ਹੋਣ ਦੀ ਇਜਾਜ਼ਤ ਦਿੰਦਾ ਹੈ, ਮਲਬੇ, ਪਲੇਟਲੈਟਸ ਅਤੇ ਲਾਲ ਰਕਤਾਣੂਆਂ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਵਿੱਚ ਵੀ ਸਹੀ ਵਿਹਾਰਕਤਾ ਨਤੀਜੇ ਪੈਦਾ ਕਰਦਾ ਹੈ।
