AOPI Dual-fluoresces Counting on määritystyyppi, jota käytetään solupitoisuuden ja elinkelpoisuuden havaitsemiseen.Liuos on yhdistelmä akridiinioranssia (vihreästi fluoresoiva nukleiinihappoväri) ja propidiumjodidia (punaisena fluoresoiva nukleiinihappoväri).Propidiumjodidi (PI) on kalvosulkuväri, joka pääsee vain soluihin, joiden kalvot ovat vahingoittuneet, kun taas akridiinioranssi pystyy tunkeutumaan populaation kaikkiin soluihin.Kun molemmat värit ovat läsnä ytimessä, propidiumjodidi vähentää akridiinioranssin fluoresenssia fluoresenssiresonanssienergiansiirron (FRET) avulla.Tämän seurauksena tumalliset solut, joissa on ehjät kalvot, värjäytyvät fluoresoivasti vihreiksi ja lasketaan eläviksi, kun taas tumalliset solut, joiden kalvot ovat vahingoittuneet, värjäävät vain fluoresoivan punaisen ja ne lasketaan kuolleiksi käytettäessä Countstar® FL -järjestelmää.Tumattomat materiaalit, kuten punasolut, verihiutaleet ja roskat, eivät fluoresoi, ja Countstar® FL -ohjelmisto jättää ne huomiotta.
Kantasoluterapian prosessi
Kuva 4 Mesenkymaalisten kantasolujen (MSC) elinkelpoisuuden ja solumäärän seuranta soluterapioissa käyttöä varten.
Määritä MSC:n elinkelpoisuus AO/PI- ja Trypan Blue -määrityksellä
Kuva 2. A. Kuva MSC:stä, joka on värjätty AO/PI:llä ja Trypan Bluella;2. AO/PI:n ja trypaanisinisen tulosten vertailu ennen ja jälkeen kuljetuksen.
Solujen taitekerroin muuttuu, Trypan Blue -värjäys ei ollut niin ilmeinen, elinkelpoisuutta on vaikea määrittää kuljetuksen jälkeen.Kaksivärinen fluoresenssi mahdollistaa elävien ja kuolleiden tumallisten solujen värjäytymisen, mutta tarkan elinkelpoisuuden tuottaminen tuottaa jopa roskia, verihiutaleita ja punasoluja.
