AOPI Dual-fluoresces talning er greiningartegundin sem notuð er til að greina frumustyrk og lífvænleika.Lausnin er blanda af acridine appelsínugult (græn-flúrljómandi kjarnsýrubletturinn) og própídínjoðíði (rauðflúrljómandi kjarnsýrubletturinn).Própídínjoðíð (PI) er himnuútilokunarlitarefni sem fer aðeins inn í frumur með skerta himnur, en acridín appelsínugult er fær um að komast í gegnum allar frumur í þýði.Þegar báðir litarefnin eru til staðar í kjarnanum veldur própídínjoðíði minnkun á akridín appelsínuflúrljómun með flúrljómunarresonance energy transfer (FRET).Fyrir vikið litast frumur með ósnortnar himnur flúrljómandi grænum og eru taldar lifandi, en kjarnafrumur með skerta himnur litast aðeins flúrljómandi rauðar og eru taldar dauðar þegar Countstar® FL kerfið er notað.Kjarnalaust efni eins og rauð blóðkorn, blóðflögur og rusl flúrljóma ekki og er hunsað af Countstar® FL hugbúnaðinum.
Ferli stofnfrumumeðferðar
Mynd 4 Vöktun á lífvænleika og frumufjölda mesenchymal stofnfrumna (MSCs) til notkunar í frumumeðferð.
Ákvarða MSC lífvænleika með AO/PI og Trypan Blue prófun
Mynd 2. A. Mynd af MSC lituð með AO/PI og Trypan Blue;2. Samanburður á AO/PI og Trypan blue niðurstöðu fyrir og eftir flutning.
Brotstuðull frumunnar breytist, Trypan Blue litun var ekki svo augljós, það er erfitt að ákvarða lífvænleika eftir flutning.Þó að tvílita flúrljómun geri litun á lifandi og dauðum kjarnafrumum, myndast nákvæmar lífvænleika niðurstöður, jafnvel þegar rusl, blóðflögur og rauð blóðkorn eru til staðar.
