AOPI Numërimi i dyfishtë fluoresces është lloji i analizës që përdoret për zbulimin e përqendrimit dhe qëndrueshmërisë së qelizave.Zgjidhja është një kombinim i akridinës portokalli (njolla e acidit nukleik jeshil-fluoreshente) dhe jodidi propidium (njolla e acidit nukleik me fluoreshente të kuqe).Jodidi i Propidiumit (PI) është një ngjyrues përjashtues i membranës që hyn vetëm në qelizat me membrana të dëmtuara, ndërsa akridina portokalli është në gjendje të depërtojë në të gjitha qelizat e një popullate.Kur të dyja ngjyrat janë të pranishme në bërthamë, jodidi i propidiumit shkakton një reduktim të fluoreshencës portokalli të akridinës nga transferimi i energjisë së rezonancës fluoreshente (FRET).Si rezultat, qelizat me bërthama me membrana të paprekura ngjyrosin ngjyrën e gjelbër fluoreshente dhe numërohen si të gjalla, ndërsa qelizat me bërthama me membrana të dëmtuara njollosin vetëm ngjyrën e kuqe fluoreshente dhe llogariten si të vdekura kur përdorin sistemin Countstar® FL.Materiali pa bërthama si qelizat e kuqe të gjakut, trombocitet dhe mbeturinat nuk fluoreshenojnë dhe injorohen nga softueri Countstar® FL.
Procesi i terapisë me qeliza staminale
Figura 4 Monitorimi i qëndrueshmërisë dhe numrit të qelizave të qelizave staminale mezenkimale (MSC) për përdorim në terapitë qelizore.
Përcaktoni qëndrueshmërinë e MSC me analizën AO/PI dhe Trypan Blue
Figura 2. A. Imazhi i MSC i ngjyrosur nga AO/PI dhe Trypan Blue;2. Krahasimi i rezultatit AO/PI dhe Trypan blu para dhe pas transportit.
Indeksi i thyerjes së qelizave ndryshon, ngjyrosja e Trypan Blue nuk ishte aq e dukshme, është e vështirë të përcaktohet qëndrueshmëria pas transportit.Ndërsa fluoreshenca me dy ngjyra lejon ngjyrosjen e qelizave me bërthama të gjalla dhe të vdekura, duke gjeneruar rezultate të sakta qëndrueshmërie edhe në prani të mbeturinave, trombociteve dhe qelizave të kuqe të gjakut.
