AOPI Dual-fluoresces hesablanması hüceyrə konsentrasiyasını və canlılığını aşkar etmək üçün istifadə edilən analiz növüdür.Həll akridin narıncı (yaşıl-flüoresan nuklein turşusu ləkəsi) və propidium yodidin (qırmızı-flüoresan nuklein turşusu ləkəsi) birləşməsidir.Propidium iyodid (PI) yalnız membranları zədələnmiş hüceyrələrə daxil olan bir membran xaric edən boyadır, akridin narıncı isə populyasiyanın bütün hüceyrələrinə nüfuz edə bilir.Hər iki boya nüvədə olduqda, propidium yodid flüoresan rezonans enerjisinin ötürülməsi (FRET) ilə akridin narıncı flüoresansında azalmaya səbəb olur.Nəticədə, membranları zədələnmiş nüvəli hüceyrələr floresan yaşıl rəngə boyanır və canlı sayılır, halbuki zədələnmiş membranları olan nüvəli hüceyrələr yalnız flüoresan qırmızı rəngə boyanır və Countstar® FL sistemindən istifadə edərkən ölü sayılırlar.Qırmızı qan hüceyrələri, trombositlər və zibil kimi nüvəsiz material floresan etmir və Countstar® FL proqramı tərəfindən nəzərə alınmır.
Kök Hüceyrə Terapiyası Prosesi
Şəkil 4 Hüceyrə müalicələrində istifadə üçün mezenximal kök hüceyrələrin (MSC) canlılığının və hüceyrə sayının monitorinqi.
AO/PI və Trypan Blue analizi ilə MSC canlılığını müəyyən edin
Şəkil 2. A. AO/PI və Trypan Blue ilə boyanmış MSC şəkli;2. Nəqliyyatdan əvvəl və sonra AO/PI və Tripan mavi nəticəsinin müqayisəsi.
Hüceyrə sındırma indeksi dəyişir, Tripan Mavisi boyanması o qədər də aydın deyildi, daşındıqdan sonra canlılığı müəyyən etmək çətindir.İki rəngli floresans canlı və ölü nüvəli hüceyrələrin rənglənməsinə imkan versə də, zibil, trombositlər və qırmızı qan hüceyrələrinin mövcudluğunda belə dəqiq canlılıq nəticələri yaradır.
