Pengiraan Dwi-pendarfluor AOPI ialah jenis ujian yang digunakan untuk mengesan kepekatan dan daya maju sel.Penyelesaiannya ialah gabungan oren acridine (noda asid nukleik pendarfluor hijau) dan propidium iodida (noda asid nukleik pendarfluor merah).Propidium iodide (PI) ialah pewarna pengecualian membran yang hanya memasuki sel dengan membran yang terjejas, manakala oren acridine mampu menembusi semua sel dalam populasi.Apabila kedua-dua pewarna terdapat dalam nukleus, propidium iodide menyebabkan pengurangan dalam pendarfluor oren acridine oleh pemindahan tenaga resonans pendarfluor (FRET).Akibatnya, sel bernukleus dengan membran utuh mengotorkan hijau pendarfluor dan dikira sebagai hidup, manakala sel bernukleus dengan membran terjejas hanya mengotorkan merah pendarfluor dan dikira sebagai mati apabila menggunakan sistem Countstar® FL.Bahan bukan nukleus seperti sel darah merah, platelet dan serpihan tidak berpendar dan diabaikan oleh perisian Countstar® FL.
Proses Terapi Sel Stem
Rajah 4 Pemantauan daya maju dan kiraan sel sel stem mesenchymal (MSC) untuk kegunaan dalam terapi sel.
Tentukan daya maju MSC melalui ujian AO/PI dan Trypan Blue
Rajah 2. A. Imej MSC yang diwarnai oleh AO/PI dan Trypan Blue;2. Perbandingan hasil AO/PI dan Trypan blue sebelum dan selepas pengangkutan.
Indeks biasan sel berubah, pewarnaan Trypan Blue tidak begitu jelas, sukar untuk menentukan daya maju selepas pengangkutan.Walaupun pendarfluor dwi-warna membenarkan pewarnaan sel nukleus hidup dan mati, menjana hasil daya maju yang tepat walaupun dengan kehadiran serpihan, platelet dan sel darah merah.
