AOPI 이중 형광 계수는 세포 농도 및 생존력을 감지하는 데 사용되는 분석 유형입니다.용액은 아크리딘 오렌지(녹색 형광 핵산 염색)와 프로피디움 요오드화물(적색 형광 핵산 염색)의 조합입니다.Propidium iodide(PI)는 손상된 막이 있는 세포에만 들어가는 막 배제 염료인 반면, acridine 오렌지는 집단의 모든 세포에 침투할 수 있습니다.두 염료가 핵에 존재할 때 요오드화 프로피듐은 형광 공명 에너지 전달(FRET)에 의해 아크리딘 오렌지 형광을 감소시킵니다.결과적으로 막이 손상되지 않은 유핵 세포는 형광 녹색으로 염색되어 살아있는 것으로 간주되는 반면 손상된 막이 있는 유핵 세포는 형광 적색으로만 염색되며 ® FL 시스템을 사용할 때 죽은 것으로 간주됩니다.적혈구, 혈소판 및 파편과 같은 핵이 없는 물질은 형광을 내지 않으며 ® FL 소프트웨어에서 무시됩니다.
줄기세포치료과정
그림 4 세포 치료에 사용하기 위한 중간엽 줄기 세포(MSC)의 생존 능력 및 세포 수 모니터링.
AO/PI 및 Trypan Blue 분석에 의한 MSC 생존력 결정
그림 2. A. AO/PI 및 Trypan Blue로 염색된 MSC의 이미지;2. 운송 전후의 AO/PI와 Trypan blue 결과 비교.
세포의 굴절률 변화, Trypan Blue 염색이 뚜렷하지 않아 수송 후 생존력을 결정하기가 어렵습니다.이중 색상 형광은 살아있는 유핵 세포와 죽은 유핵 세포를 염색할 수 있지만 파편, 혈소판 및 적혈구가 있는 경우에도 정확한 생존 결과를 생성합니다.
