AOPI Dual-fluoresces counting on testitüüp, mida kasutatakse rakkude kontsentratsiooni ja elujõulisuse tuvastamiseks.Lahus on kombinatsioon akridiinoranžist (roheliselt fluorestseeruv nukleiinhappevärv) ja propiidiumjodiidist (punaselt fluorestseeruv nukleiinhappevärv).Propidiumjodiid (PI) on membraani välistav värv, mis siseneb ainult kahjustatud membraanidega rakkudesse, samas kui akridiinoranž suudab tungida kõigisse populatsiooni rakkudesse.Kui tuumas on mõlemad värvained, vähendab propiidiumjodiid akridiinoranži fluorestsentsi fluorestsentsresonantsenergia ülekande (FRET) abil.Selle tulemusena värvuvad tervete membraanidega tuumarakud fluorestseeruvalt roheliseks ja neid loetakse elavateks, samas kui kahjustatud membraanidega tuumarakud värvuvad ainult fluorestseeruvalt punaseks ja Countstar® FL süsteemi kasutamisel loetakse need surnuks.Tuumata materjalid, nagu punased verelibled, trombotsüüdid ja praht, ei fluorestseeru ja Countstar® FL tarkvara ignoreerib neid.
Tüvirakuteraapia protsess
Joonis 4 Mesenhümaalsete tüvirakkude (MSC) elujõulisuse ja rakkude arvu jälgimine rakuteraapias kasutamiseks.
Määrake MSC elujõulisus AO/PI ja Trypaan Blue testiga
Joonis 2. A. MSC kujutis, mis on värvitud AO/PI ja trüpaansinisega;2. AO/PI ja trüpaansinise tulemuse võrdlus enne ja pärast transporti.
Rakkude murdumisnäitaja muutub, trüpaansinine värvumine ei olnud nii ilmne, pärast transporti on elujõulisust raske määrata.Kuigi kahevärviline fluorestsents võimaldab värvida elusaid ja surnud tuumaga rakke, annab täpse elujõulisuse tulemuse isegi prügi, trombotsüütide ja punaste vereliblede juuresolekul.
