Падлік AOPI падвойным флюарэсцэнтам - гэта тып аналізу, які выкарыстоўваецца для выяўлення канцэнтрацыі клетак і жыццяздольнасці.Раствор ўяўляе сабой камбінацыю акрыдынавага аранжавага колеру (зялёны флуоресцентный афарбоўка нуклеінавых кіслот) і пропидия ёдыду (чырвонага флуоресцентного афарбоўвання нуклеінавых кіслот).Ёдыд пропидия (PI) - гэта фарбавальнік для выключэння мембран, які пранікае толькі ў клеткі з парушанымі мембранамі, а акрыдынавы аранжавы здольны пранікаць ва ўсе клеткі папуляцыі.Калі ў ядры прысутнічаюць абодва фарбавальнікі, ёдыд пропідыю выклікае памяншэнне флюарэсцэнцыі акрыдынавага аранжавага колеру за кошт флуоресцентного рэзананснага перадачы энергіі (FRET).У выніку ядровыя клеткі з непашкоджанымі мембранамі афарбоўваюцца ў флуоресцентный зялёны колер і лічацца жывымі, тады як клеткі з ядрамі з парушанымі мембранамі афарбоўваюць толькі ў флуоресцентный чырвоны колер і лічацца мёртвымі пры выкарыстанні сістэмы Countstar® FL.Без'ядравыя матэрыялы, такія як эрытрацыты, трамбацыты і абломкі, не флуоресцируют і ігнаруюцца праграмным забеспячэннем Countstar® FL.
Працэс тэрапіі ствалавымі клеткамі
Малюнак 4 Маніторынг жыццяздольнасці і колькасці клетак мезенхімальных ствалавых клетак (МСК) для выкарыстання ў клеткавай тэрапіі.
Вызначыць жыццяздольнасць МСК з дапамогай аналізу AO/PI і Трыпанавы блакітны
Малюнак 2. А. Выява МСК, афарбаваная AO/PI і Трыпанавым сінім;2. Параўнанне выніку AO/PI і Трыпанавай сіні да і пасля транспарціроўкі.
Паказчык праламлення клетак змяняецца, афарбоўка Трыпанавым сінім не была такой відавочнай, цяжка вызначыць жыццяздольнасць пасля транспарціроўкі.У той час як двухколерная флуарэсцэнцыя дазваляе афарбоўваць жывыя і мёртвыя клеткі з ядрамі, ствараючы дакладныя вынікі жыццяздольнасці нават у прысутнасці смецця, трамбацытаў і эрытрацытаў.
