AOPI Dual-Fluoreszenzzielung ass den Assay-Typ deen benotzt gëtt fir Zellkonzentratioun a Viabilitéit z'entdecken.D'Léisung ass eng Kombinatioun vun Acridin orange (de gréng-fluoreszent Nukleinsäure Fleck) a Propidium Jodid (de roude-fluoreszent Nukleinsäure Fleck).Propidium Jodid (PI) ass e Membran Ausgrenzungsfaarf deen nëmmen Zellen mat kompromittéierte Membranen erakënnt, während Acridin orange fäeg ass all Zellen an enger Bevëlkerung ze penetréieren.Wa béid Faarfstoffer am Kär präsent sinn, verursaacht Propidiumjodid eng Reduktioun vun der Acridin orange Fluoreszenz duerch Fluoreszenz Resonanz Energie Transfert (FRET).Als Resultat, nukleéiert Zellen mat intakte Membranen fluoreszent gréng a ginn als lieweg gezielt, wärend nukleéiert Zellen mat kompromittéierte Membranen nëmmen fluoreszent rout flecken an als dout gezielt ginn wann Dir de Countstar® FL System benotzt.Net-nukleéiert Material wéi rout Bluttzellen, Plättchen a Schutt fluoreszen net a ginn vun der Countstar® FL Software ignoréiert.
Prozess vun der Stammzelltherapie
Figure 4 Iwwerwachung vun der Viabilitéit an der Zellzuel vu mesenchymal Stammzellen (MSCs) fir d'Benotzung an Zelltherapien.
Bestëmmt MSC Viabilitéit duerch AO / PI an Trypan Blue Assay
Figur 2. A. Bild vun MSC Kierchefënster vun AO /PI an Trypan Blue;2. Verglach vun AO / PI an Trypan blo Resultat virun an no Transport.
Den Zellbrechungsindex ännert sech, Trypan Blue Faarf war net sou offensichtlech, et ass schwéier d'Viabilitéit nom Transport ze bestëmmen.Wärend Dual-Faarf Fluoreszenz erlaabt d'Faarwen vu liewegen an dout nukleéierten Zellen, generéiert genee Viabilitéitsresultater och a Präsenz vu Schutt, Plättchen a roude Bluttzellen.
