АОПИ Дуал-флуоресцент цоунтинг је тип теста који се користи за откривање концентрације и одрживости ћелија.Решење је комбинација акридин наранџе (зелена флуоресцентна боја нуклеинске киселине) и пропидијум јодида (црвена флуоресцентна боја нуклеинске киселине).Пропидијум јодид (ПИ) је боја за искључивање мембране која улази само у ћелије са угроженим мембранама, док акридин наранџаста може да продре у све ћелије у популацији.Када су обе боје присутне у језгру, пропидијум јодид изазива смањење флуоресценције акридин наранџасте боје преносом енергије флуоресцентне резонанце (ФРЕТ).Као резултат тога, ћелије са једром са нетакнутим мембранама боје се флуоресцентно зеленом бојом и рачунају се као живе, док ћелије са језгром са угроженим мембранама боје само флуоресцентно црвено и рачунају се као мртве када се користи Цоунтстар® ФЛ систем.Материјали без језгре као што су црвена крвна зрнца, тромбоцити и остаци не флуоресцирају и игноришу их софтвер Цоунтстар® ФЛ.
Процес терапије матичним ћелијама
Слика 4 Мониторинг виталности и броја ћелија мезенхималних матичних ћелија (МСЦ) за употребу у ћелијској терапији.
Одредите одрживост МСЦ помоћу АО/ПИ и Трипан Блуе теста
Слика 2. А. Слика МСЦ обојена АО/ПИ и Трипан Блуе;2. Поређење резултата АО/ПИ и Трипан плаве пре и после транспорта.
Индекс преламања ћелија се мења, бојање трипан плавим није било тако очигледно, тешко је одредити одрживост након транспорта.Док двобојна флуоресценција омогућава бојење живих и мртвих ћелија са језгром, генерисање тачних резултата одрживости чак и у присуству остатака, тромбоцита и црвених крвних зрнаца.
