AOPI қос флуоресцентті санау - жасуша концентрациясы мен өміршеңдігін анықтау үшін қолданылатын талдау түрі.Ерітінді акридин қызғылт сары (жасыл-флуоресцентті нуклеин қышқылы дақ) және пропидий йодид (қызыл-флуоресцентті нуклеин қышқылы дақ) комбинациясы болып табылады.Пропидий йодид (PI) - мембранадан шығарылатын бояғыш, ол тек мембранасы бұзылған жасушаларға енеді, ал акридин апельсин популяциядағы барлық жасушаларға енеді.Екі бояғыш ядрода болған кезде, пропидий йодид флуоресценциялық резонансты энергияны тасымалдау (FRET) арқылы акридинді қызғылт сары флуоресценцияның төмендеуін тудырады.Нәтижесінде мембранасы бұзылмаған ядросы бар жасушалар флуоресцентті жасыл түске боялады және тірі болып саналады, ал қабығы бұзылған ядролы жасушалар тек флуоресцентті қызыл түске боялады және Countstar® FL жүйесін пайдаланған кезде өлі болып есептеледі.Эритроциттер, тромбоциттер және қоқыстар сияқты ядросыз материал флуоресценттенбейді және оларды Countstar® FL бағдарламалық құралы елемейді.
Дің жасушалары терапиясының процесі
4-сурет Жасуша терапиясында қолдану үшін мезенхималық бағаналы жасушалардың (MSC) өміршеңдігі мен жасушаларының санын бақылау.
AO/PI және Trypan Blue талдауы арқылы MSC өміршеңдігін анықтаңыз
Сурет 2. A. AO/PI және Trypan Blue арқылы боялған MSC кескіні;2. Тасымалдау алдындағы және кейінгі AO/PI және Trypan көк нәтижесін салыстыру.
Жасушаның сыну көрсеткіші өзгереді, Trypan Blue бояуы соншалықты айқын болмады, тасымалдаудан кейін өміршеңдігін анықтау қиын.Қос түсті флуоресценция тірі және өлі ядролы жасушаларды бояуға мүмкіндік бергенімен, тіпті қоқыс, тромбоциттер және қызыл қан жасушалары болған кезде де нақты өміршеңдік нәтиже береді.
